1990 Fiscal Year Annual Research Report
アセチルコリン合成酵素遺伝子及びその関連遺伝子の構造と発現調節機構の解明
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01580176
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
伊藤 信行 京都大学, 薬学部, 助教授 (10110610)
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| Keywords | 神経伝達物質 / 遺伝子 / ショウジョウバエ |
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| Research Abstract |
抗アセルチコリン合成酵素単クロ-ン抗体はDrosophilaの神経組織(主として、神経網)に特異的に結合することが示されている。この単クロ-ン抗体はアセチルコリン合成酵素以外にも約150Kダルトンのタンパク質にも強く結合することが明らかになった。従って,この150Kタンパク質は神経組織特異的タンパク質と期待され,その実態を明らかにする目的で、このDNAを単離した。その塩基配列より、このタンパク質のC末端アミノ酸配列(約400アミノ酸残基)が明らかになった。その結果、このタンパク質のC末端構造には、Gln、Glu、Arg、の三種のアミノ酸含量が非常に高く、また,くりかえし配列がいくつか見られるなどの、特異的な構造を有していることが明らかになった。
抗西洋ワサビペルオキシダ-ゼ(HRP)抗体は、Drosophilaの神経細胞と特異的に反応し、そのエピト-プはHRPの糖鎖と共通の構造を持つと推定されている。この神経細胞に特異的糖鎖エピト-プ構造を明らかにするため,HRPの糖鎖を単離した。その主要な糖鎖はGlcNAc,Man,Fuc,Xyl,からなり,その構造はNMRによって(Fuc)_1(Xyl)_1(Man)_3(GlcNAc)_2Asnであることを明らかにした。さらに、糖鎖のどの糖残基にエピト-プ活性を持っているかを明らかにするため,糖鎖を種々のグリコシダ-ゼで消化し,そのエピト-プ活性を調べたところ,主として,α1→3Fucがエピト-プ活性に関していることが明らかになった。
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[Publications] A.Kurosaka et al.: "The Structure of a neural specific carbohydrate epitope of horseradish peroxidase(HRP)recognized by antiーHRP antiserum" J.Biol.Chem.266. (1991)
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[Publications] M.Ohta et al.: "Improved radioassay of antiーacetylcholine receptor antibody:Application for the detection of extremely low antibody titers in sera from patienta with myastenia gravis" Clinical Chemistry. 36. 911-913 (1990)
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[Publications] M.Ohta et al.: "Antibodies to synthetic peptide (125ー148) of the αーsubunit of human nicotinic acetltlcholine receptor in sera from pateints with myasthenia gravis" Neurology. 40. 1776-1778 (1990)
