1989 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
01654003
|
|---|
| Research Institution | Yokohama City University |
|---|
Principal Investigator |
浅島 誠 横浜市立大学, 文理学部, 教授 (00090564)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木下 圭 日本医科大学, 医・生物, 助手 (50181764)
|
|---|
| Keywords | 中胚葉誘導 / 分化誘導因子 / 両生類胚 / ツメガエル胚 / EDF / アクチビンA / 胚発生 |
|---|
| Research Abstract |
両生類の後期胞胚や初期原腸胚の予定外胚葉は未分化細胞塊とみることができる。この未分化細胞塊に働いて脊索や筋肉などの中胚葉性組織の分化誘導物質の存在が明かとなった。まず、哺乳動物のミエロモノサイト由来のKー562株やTHPー1株、あるいは繊維芽腫瘍由来のHT・1080など22種の細胞株のコンディションメディウムの中に中胚葉性分化誘導能をもつ物質が存在するかどうかをイモリ胚およびツメガエルの予定外胚葉を用いて行われた。この中から9種の細胞株のコンディションメディウム中に高い中胚葉性の分化誘導能があることがわかった。そこでコンディションメディウム中に含まれる物質について、それたをDEAEカラムクロマトグラフィーや逆相カラムクロマトグラフィーなどで分析していくと単一の物質が精製された。その後、アミノ酸配列等を調べてみるとEDFと同一の物質であった。これらは、現在、またアクチビンAともよばれる物質で、TGFーβファミリーの1つの物質であった。そこでクローニングした遺伝子より合成したアクチビンA(またはEDF)そのものを用いて誘導能を調べたところ10ng/mlでも約70%が中胚葉分化を示した。そして50ng/mlでは調べた外植体のほぼすべてに筋肉や脊索、間充識など中胚葉性分化がみられた。アクチビンAは中胚葉分化誘導因子の一つであり、これは現在まで知られている因子の中で最も低濃度で中胚葉分化誘導をおこす物質である。アクチビンAをツメガエルの予定外胚葉に作用させたところ10ng/mlでも非常に高い中胚葉性活性をもつことがわかった。その後、ラットのアクリビンAをプローブとして、ツメガエルのcーDNAのライプラリーの中からアクチビンcーDNAに対してホモロジーをもつDNAをスクリーニングしたところM3、B9とC4という3つのDNAクローンを得ることができた。
|
-
[Publications] Asashima M.,H.Nakano,K.Shimada,K.Kinoshita,K.Ishii,H.Shibai and N.Ueno: "Mesodermal Induct in Early Amohibian Embryos by Activin A(=EDF)" Roux'Archiv.Develop.Biol.198. 330-335 (1990)
-
[Publications] Uehara M.,M.Taguchi,M.Asashima and C.J.Pfeiffer: "Developmental Phygiology of cardiac contraction in the Japanese newt in vivo and in vitro." J.Molecular and Cell.Cardiology.21. 709-718 (1989)
-
[Publications] Asashima M.,T.Oinuma,and S.Komazaki: "Electron microscopical and histochemical studies of the spontaneous tumors of Xenopus laevis." Zool.Science. 6. 899-905 (1989)
-
[Publications] Asashima M.,K.Shimada,H.Nakano,K.Kinoshita,and N.Ueno: "Mocoderm Induction by Activin A(EDF)in Xenopus Early Embryo" Cell Differentiation and Development. 27. 171 (1989)
-
[Publications] Taguchi M.,M,Uehara,M.Asashima and C.J.Pfeiffer: "Development of the heartbeat during normal ontogeny and during long term organ culture of hearts of the newt,Cynops pyrrhogaster." Cell Deffer.and Develop.27. 95-102 (1989)
-
[Publications] 木下圭,浅島誠: "細胞成長因子による胚誘導" 実験医学. 7. 1161-1168 (1989)
-
[Publications] Asasima M.,G.M.Malasinski and S.C.Smith: "Surgical manipulation of embryos.In:Develpopmental Biology of the Axolotl.eds.J.B.Armstrong and G.M.Malacinski" Oxford University Press, 9 (1989)
-
[Publications] 浅島誠,木下圭: "形態形成のシグナルとしての誘導因子「形態形成プログラムー細胞社会とその形成」江口吾朗,鈴木義昭,名取俊二編" 東京大学出版会, 16 (1989)
