1989 Fiscal Year Annual Research Report
Dimethyl sulfoxide(DMSO)によるタンパク質分画法の確立
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01870016
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Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research
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| Research Institution | Okazaki National Research Institutes |
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Principal Investigator |
江橋 節郎 岡崎国立共同研究機構, 生理学研究, 所長 (10009863)
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| Keywords | DMSO / DMSO分画 / タンパク質分画 / アセトン分画 |
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| Research Abstract |
我々は偶然の機会から、Dimethyl sulfoxide(DMSO)が硫酸アンモニウム(硫安)に匹敵する(あるいはそれよりも優れた)タンパク質分画剤であることを発見した。
現在までの筋収縮タンパク質における成績を略述すると、
1)DMSO分画は本質的に、アセトン分画など他の有機溶媒分画と変わらない。即ち、温度が低いほど沈澱性が増し、またある至適イオン強度(0.1〜0.2)をもつ。また、混合熱が高いので注意する必要があるが、10℃以下に保つことができれば、変性の恐れはない。
2)DMSO中のタンパク質沈澱性は原則として分子量に比例する。硫安は酸性蛋白が相対的に沈澱性が低いが、DMSOではこの差が少ない。
3)分画による変性度は硫安より寧ろ少ない。殊に分画を繰り返した時、その差は歴然としている。
4)DMSO分画のpH依存性は複数である。一般的に弱アルカリ性で沈澱分画が上昇するが同時に変性度も増加する。弱酸性の変性度は主としてタンパク質自体の性質によって左右される。
5)タンパク質分画の問題ではないが、DMSOの混合熱の大きさはアセトン、アルコ-ルの比でなく、検討した有機溶媒の中で最高であった。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Ebashi,S., Koga,R.: "Desensitization of smooth muscle natural actomyosin" Proc.Japan Academy. 64(B)4. 98-101 (1988)
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[Publications] Ebashi,S.and Kuwayama,H.: "Calcium regulation of smooth muscle contraction" In Calcium Signal and Cell Response(eds.by Yagi,K.and Miyazaki,T)Japan Sci.Soc.press,Tokyo,Springer-Verlag,Berlin. 143-150 (1988)
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[Publications] Kuwayama,H.and Ebashi,S: "Isolation from bovine brain of 155 kDa component exhibiting myosin light chain kinase activity" J.Biochem. 104. 858-861 (1988)
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[Publications] Kuwayama,H.,Suzuki,M.,Koga,R.and Ebashi,S.: "Preparation of protein components exhibiting myosin light chain kinase activities from bovine aorta:Discrepancies between its enzyme activity and actomyosin activating effect" J.Biochem.104. 862-866 (1988)
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[Publications] Ishizaki,Y., Mikawa,T.,Ebashi,S.,Yokota,E.,Hosoya,H.and Kuroda,K.: "Preparation of tubulin from caulerpa,a marine green alga,using casein as a protective agent against proteolytic degradation" J.Biochem.104. 329-332 (1988)
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[Publications] Ebashi,S.,Koga,R.: "The use of dimethyl sulfoxide(DMSO)for protein fractionation" Proc.Japan Academy. 64(B)10. 323-326 (1988)
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[Publications] Ebashi,S.(eds.by Paul,R.J.,Elzinga,G and Yamada,K): "Calcium Regulation of Smooth Muscle Contraction.In Muscle Energetics" Alan R.Liss,Inc.New York, 239-251(627) (1989)
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[Publications] Ebashi,S.(eds.by N.Sperelakis and J.D.Wood): "Development of Ca^<2+> concept in smooth muscle research.In Frontiers in smooth muscle research" Alan R.Liss,Inc.New York, 159-165(849) (1990)
