1990 Fiscal Year Annual Research Report
HLA遺伝子導入マウスを応用したHLAアロ抗原に特異的な単クロ-ン抗体の開発
Project/Area Number |
01870026
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Research Category |
Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
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Research Institution | Kyushu University |
Principal Investigator |
西村 泰治 九州大学, 生体防御医学研究所, 助教授 (10156119)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木村 彰方 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (60161551)
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Keywords | 単クロ-ン抗体 / ハイブリド-マ / HLAトランスジェニックマウス / HLAアロ抗原 / HLAタイピング |
Research Abstract |
従来のHLAタイピング用の抗血清は経産婦血清あるいは分娩血に由来するアロ抗血清が主流であったが、その一部は単クロ-ン抗体(mAb)により代用されるようになってきた。しかし、マウスにヒトB細胞を免疫して抗HLAクラスIImAbを作製した場合、多くはフレ-ムワ-クを認識し、アロエプト-プに特異的なmAbを得ることは比較的難しい。本年度我々は、HLAーDQw6トランスジェニックC57BL/6マウス(DQw6ーB6)に、ヒトB細胞株を免疫することにより、HLAクラスIIアロエピト-プに特異的なmAbを作製した。 8週令の(DQw6ーB6×C3H)F1にHLAホモ接合Bリンパ芽球様細胞株を腹腔内に接種し、3週後追加免疫を行い、その4日後P3X63ーU1と通常のPEGを用いた方法により細胞融合を行った。免疫にもちいたHLAホモ接合Bリンパ芽球様細胞株、他のハプロタイプを有するHLAホモ接合Bリンパ芽球様細胞株パネル、末梢血リンパ球、形質転換L細胞を間接蛍光抗体法により染色し、フロ-サイトメトリ-により、ハイブリド-上清中に分泌された単クロ-ン個体の特異性を検討した。その結果、HLAーDw1ハピロタイプに特異性を有する2D9(IgG2b)、2E3(IgG1)の2種のmAbを得た。
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[Publications] Nishimura,Y.: "Expression of human major histocompatibility complex,HLAーDQw6 genes alters the immuneresponse in C57BL/6 mice." Journal of Immunology. 145. 353-360 (1990)
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[Publications] Sasazuki,T.: "HLA linked immune suppression genes." Japanese Journal of Human Genetics. 35. 1-13 (1990)
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[Publications] Ottenhoff,T.H.M.: "HLAーDQ molecules and the control of Mycobacterium Leprae specific T cell nonresponsiveness in lepromatous leprosy patients." European Journal of Immunology. 20. 2347-2350 (1990)
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[Publications] Kamikawaji,N.: "HLAーDQ restricted CD4^+ T cells specific to streptococcal antigen exist in low responders but not in high responders." Journal of Immunology.
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[Publications] 西村 泰治: "HLAーDQトランスジェニックマウス" 医学のあゆみ. 154. 482 (1990)
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[Publications] 西村 泰治: "免疫応答および疾患感受性を支配する遺伝要因" 日本体質学会雑誌. 54. 45-47 (1990)
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[Publications] 木村 彰方: "HLA領域遺伝子群" 肺と心. 37. 277-283 (1990)
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[Publications] 木村 彰方: "HLAクラスII遺伝子群" 蛋白質・核酸・酵素. 35. 3091-3103 (1990)
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[Publications] 木村 彰方: "MHC抗原の細胞分布" 日本臨床. 48. 551-553 (1990)
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[Publications] 木村 彰方: "MHC遺伝子の配置" 日本臨床. 48. 554-556 (1990)
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[Publications] 稲光 毅: "MHCとself peptideー免疫応答におけるself peptideの役割" 実験医学. 8. 77-80 (1990)
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[Publications] 吉住 秀之: "HLAと免疫抑制遺伝子" 日本臨床. 607. 568-573 (1990)
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[Publications] 稲光 毅: "トランスジェニックマウスに発現されたHLAーDQ分子の免疫学的機能に関する研究" 福岡医学雑誌. 82. 59-70 (1991)
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[Publications] 川原田 富朗: "HLAーDQw6遺伝子のマウス・コラ-ゲン誘導性関節炎に対する抑制効果" 福岡医学雑誌. 82. 71-85 (1991)
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[Publications] 西村 泰治: "Annual Review免疫1991 MHCトランスジェニックマウス" 中外医学社, 10 (1991)
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[Publications] 西村 泰治: "トランスジェニックマウスを用いたMHCの解析 「生化学実験講座」第12巻分子免疫学" 東京化学同人 東京, (1991)