HLA遺伝子導入マウスを応用したHLAアロ抗原に特異的な単クロ-ン抗体の開発

1991 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 01870026
• Research Institution: Medical Institute of Bioreguration, Kyushu University
• Principal Investigator: 西村 泰治 九州大学, 生体防御医学研究所, 助教授 (10156119)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 木村 彰方 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (60161551)
• Keywords: 単クロ-ン抗体 / HLA / アロ抗原性 / HLAトランスジェニックマウス / ハイブリド-マ / 細胞融合

Research Abstract

骨髄移植をはじめとする臓器移植においてドナ-とレシピエント間の主要組織適合抗原(HLA)を一致させることは、移植臓器の生着率を向上させるために非常に重要である。このためには、HLAタイピング用の抗血清を必要とするが、現在のように経産婦血清の中から、抗HLA抗体を含むものをスクリ-ニングする作業は時間と労力を要し、しかも抗血清が有限であるために安定した抗HLA抗体の供給は困難である。本研究はHLA遺伝子を導入したトランスジェニックマウス(TGM)を作製し、これにヒト細胞を免疫することにより、HLAのアロ抗原性を特異的に認識する単クロ-ン抗体を作ることを目的とし、本年度は以下の成果を納めた。HLA-DRα鎖遺伝子を導入しDRαEβ分子の発現の組織特異性が異なる3系統のTGMを樹立した。これらのTGMに発現されたHLA分子は、免疫学的な機能を有し、マウスリンパ球に混合リンパ球培養反応を刺激し、さらに特定の抗原に対するマウスの免疫応答性を変化させた。HLA-DRαTGMにヒトBリンパ芽球様細胞株を免疫し、その脾細胞をマウス骨髄腫細胞株と細胞融合することにより、HLA-DR2に関連するHLAクラスII分子のアロ抗原性を識別する単クロ-ン抗体を分泌するハイブリド-マを数種類樹立した。現在、他のHLAクラスII遺伝子を発現するTGMを続々と樹立中であり、これらを利用することにより、多様な特異性を有する単クロ-ン抗体を作製することが出来るものと期待される。

Research Products

• [Publications] Kamikawaji,N.,Fujisawa,K.,Yoshizumi,H.,Fukunaga,M.,Yasunami,M.,Kimura,A.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.: "HLA-DQ restricted CD4^+ T cells specific to streptococcal antigen exist in low responders but not in high responders." Journal of Immunology. 146. 2560-2567 (1991)
• [Publications] Nagafuchi,S.,Kashiwagi,S.,Okada,K.,Anzai,K.,Nakamura,M.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.,Niho,Y.: "Reversal of non-responders and postexposure prophylaxis by intradermal hepatitis B vaccination in Japanese medical personnel." Journal of American Medical Association. 265. 2679-2683 (1991)
• [Publications] Nishimura,Y.,Okubo,R.,Minato,S.,Itoyama,Y.,Goto,I.,Mori,M.,Hirayama,K.,Sasazuki,T.: "A possible association between HLA and HTLV-I associated myelopathy(HAM)in Japanese." Tissue Antigens. 37. 230-231 (1991)
• [Publications] Fujisawa,K.,Kamikawaji,N.,Yasunami,M.,Kimura,A.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.: "High precursor frequency of human T cells reactive to HLA-DQ molecules expressed on mouse L cell transfectants." European Journal of Immunology. 21. 2341-2347 (1991)
• [Publications] Nishimura,Y.,Kamikawaji,N.,Fujisawa,K.,Yoshizumi,H.,Yasunami,M.,Kimura,A.,Sasazuki,T.: "Genetic control of immune response and disease susceptibility by the HLA-DQ gene.In“The proceedings of the international symposium on Ir gene;from Biology to Medicine"" Research in Immunology. 142. 459-466 (1991)
• [Publications] Inamitsu,T.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.: "Different recognition of transgenic HLA-DQw6 molecules by mouse CD4^+ and CD8^+ T cell." Immunogenetics. 35. 46-50 (1992)
• [Publications] Dong,R.P.,Kimura,A.,Numano,F.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.: "HLA-linked susceptibility and resistance to Takayasu arteritis." Heart and Vessels,Supplement 7.
• [Publications] Dong,R.P.,Kimura,A.,Sasazuki,T.: "Sequence analysis of three noble DRw14-DRB1 alleles." Immunogenetics.
• [Publications] Dong,R.P.,Kimura,A.,Numano,F.,Yajima,M.,Hashimoto,Y.,Kishi,Y.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.: "HLA-DP antigen and Takayasu arteritis" Tissue Antigens.
• [Publications] Hatae,K.,Kimura,A.,Okubo,R.,Watanabe,H.,Erlich,H.,Ueda,K.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.: "Genetic control of non-immune responsiveness to hepatitis B virus vaccine by an extended HLA haplotype." European Journal of Immunology.
• [Publications] 西村 泰治: "ヒトの免疫応答と疾病感受性の遺伝支配" からだの科学. 12. 149-155 (1991)
• [Publications] 西村 泰治: "自己免疫疾患とHLA遺伝子" 細胞工学. 10Suppl.S161-S170 (1991)
• [Publications] 西村 泰治、笹月 健彦: "HLA-DQによる免疫応答の制御" Medical Immunology. 21. 171-177 (1991)
• [Publications] 西村 泰治: "HLAの分子生物学と自己免疫疾患" 実験医学. 10. 33-39 (1992)
• [Publications] 西村 泰治、上川路 信博、笹月 健彦: "抗原特異的T細胞増殖反応による免疫抑制遺伝子の解析「生化学実験講座」第12巻分子免疫学II免疫遺伝学・アレルギ-、日本生化学会編" 東京化学同人東京, 6 (1991)
• [Publications] 西村 泰治: "トランスジェニックマウスを用いたMHCの解析「生化学実験講座」第12巻分子免疫学II免疫遺伝学・アレルギ-、日本生化学会編" 東京化学同人東京, 7 (1991)
• [Publications] Fukui,Y.,Esaki,Y.,Yasunami,M.,Kimura,K.,Hirokawa,K.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.: "T cell repertoire and self-tolerance in the transgenic mice with HLA-DRA on X chromosome.in “HLA 1991 Vol.II"eds.Tsuji,K.,Aizawa,M.,Sasazuki,T." Oxford University Press,Oxford, (1992)
• [Publications] Esaki,Y.,Fukui,Y.,Yasunami,M.,Kimura,A.,Hirokawa,K.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.: "Functional expression of HLA-DQw4 genes in a line of transgenic C57BL/6 mouse.in“HLA 1991 Vol.II"eds.Tsuji,K.,Aizawa,M.,Sasazuki,T." Oxford University Press,Oxford, (1992)
• [Publications] Yoshizumi,H.,Kamikawaji,N.,Okumura,K.,Nishimura,Y.,Sasazuki,T.: "Down regulation of immune response by CD8^+ cytotoxic T cells specific to autologous antigen presenting cells.in“HLA 1991 Vol.II"eds.Tsuji,K.,Aizawa,M.,Sasazuki,T." Oxford University Press,Oxford, (1992)
• [Publications] Kimura,A.,Sasazuki,T.: "Organization and design of the DNA component of the 11th HLA Workshop.in“HLA 1991 Vol.I"eds.Tsuji,K.,Aizawa,M.,Sasazuki,T." Oxford University Press,Oxford, (1992)
• [Publications] Nishimura,Y.,Kamikawaji,N.,Fujisawa,K.,Yoshizumi,H.,Yasunami,M.,Kimura,A.,Sasazuki,T.: "Contribution of th HLA-DQ gene in controling immune response and disease susceptibility.In“The proceedings of the international congress on genetic intervention for diseases with unknown etiology"in“Molecular Approaches to the Study and Treatment of Human Diseases"eds T.O.Yoshida & J.M.Wilson" Elsevier Science Publisher,