アデノウイルスによる形質転換細胞のジアシルグリセロ-ルによる選択的破壊とその応用

1990 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 02152087
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 木村 元喜 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (00031964)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 古賀 泰裕 九州大学, 生体防御医学研究所, 助教授 (60170221) ; 奥田 篤行 九州大学, 生体防御医学研究所, 助教授 (90032193)
• Keywords: 制癌剤 / ジアシルグリセロ-ル / リン脂質 / E1A遺伝子 / 3Y1細胞 / 癌細胞株

Research Abstract

制癌剤としての脂質の応用の可能性を検討するため、ラットの培養2倍体線維芽細胞株3Y1と、それから派生した各種のDNAウイルス、RNAウイルス、癌遺伝子、突然変異原によって癌化した3Y1細胞株に対する各種リン脂質による致死効果を調べた。ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリンおよびホスファチジルノシト-ルの培養液への投与は、アデノウイルス12型(Ad12)によって癌化した3Y1細胞のみを選択的に殺傷した。この選択的殺傷作用は、ジリノレオイルグリセロ-ル(DLG)によって代替された。DLGに対する特異的感受性はAd12のE1A遺伝子の12Sおよび13SmRNA産物によって規定されていた。DLG処理によって脂質過酸化物が顕著に増量した。DLG処理による細胞膜の部分的損傷が電子顕微鏡により観察された。
ヒト癌のなかにE1A発規3Y1細胞に似た生化学的特徴を持つものがあれば、ホスファチジルコリンやDLGによる化学療法の対象になり得ると考えた。そこで、ヒト癌由来の細胞株のDLG感受性を調べた。各種臓器の固形癌由来の11株の細胞株にDLG感受性の強いものは見つからなかった。白血病由来の細胞株10株の内、HTLVーI由来の1株が比較的感受性が強かったが、E1A発現3Y1細胞に見られるほど強い感受性は示さなかった。
Ad12で癌化した細胞は細胞膜が変化しており、この細胞膜の変化がDLG感受性と関係していると考えられている。ヒトの癌細胞の中にも同じ様な変化が起きているものがあればこの細胞はDLGに感受性になっているはずである。さらに多くのヒト癌由来の細胞株のDLG感受性を調べることにより、DLGの制癌剤としての応用への可能性を検討する必要がある。

Research Products

• [Publications] Murata,M.,Yano,T.,Togami,M.,Yasumoto,K.,Sugimachi,K.,Kimura,G.,Nomoto,K.: "Development of a new culture system for human lymphokineーactivated killer cells" J.Immunol.129. 89-95 (1990)
• [Publications] Okuda,A.,Kimura,G.: "Cellーcycle independent increase in heat production in response to growth factors in cultured rat fibroblasts:Interpretation by continuum modol" Cell Biol.Int.Rep.14. 15-24 (1990)
• [Publications] Koga,Y.,Sasaki,M.,Yoshida,H.,Wigzell,H.,Kimura,G.,Nomoto,K.: "Cytopathic effect dtermined by the amount of CD4 moloecules in human cell lines expressing envelope glycoprotein of HIV" J.Immunol.144. 94-102 (1990)
• [Publications] Shimura,H.,Mitsudomi,T.,Matsuzaki,A.,Kabemura,M.,Okuda,A.Kimura,G.: "Transformation by vーHー<ras>___ー does not restore proliferation of a set of temperatureーsensitive cellーcycle mutants of rat 3Y1 fibroblasts" Cell Struct.Funct.15. 211-219 (1990)
• [Publications] Onodera,K.,Takahashi,T.,Watanabe,R.,Ishibashi,Y.,Sasaki,M.,Kimura,G.: "Distribution of glial fibrillary acidic protein (GFAP) in the intermediate filaments of the cultured cells from a patient with tuberous sclerosis" J.Dermatol.17. 395-402 (1990)
• [Publications] OkamotoーInoue,M.,Taniguchi,S.,Sadano,H.,Kawano,T.,Kimura,G.,Gabbiani,G.,Baba,T.: "Alteration in expression of smooth muscle αーactin associated with transformation of rat 3Y1 cells" J.Cell Sci.96. 631-637 (1990)
• [Publications] Yano,T.,Murata,M.,Yoshino,I.,Ishida,T.,Kimura,G.,Sugimachi,K.,Nomoto,K.: "Effect of an antiーCD3 antibody on the culture of lymphokine activated killer celler from human lymph node lymphocytes" Cancer J.3. 154-158 (1990)
• [Publications] Ohーhori,N.,Koga,Y.,Yoshida,H.,Morita,M.,Kimura,G.,Nomoto,K.: "Human Tーcell leukemia virus typeーIーinfected Tーcell lines scarcely produce p56^<lck>,whether or not they express <lck>___ー mRNA" Int.J.Cancer. 46. 315-319 (1990)
• [Publications] Koga,Y.,Sasaki,M.,Nakamura,K.,Kimura,G.,Nomoto,K.: "Intracellular distribution of the envelope glycoprotein of human immunodeficiency virus and its role in the production of cytopathic effect in CD4^+ and CD4^ー human cell lines" J.Virol.64. 4661-4671 (1990)
• [Publications] Okuda,A.,Sasaki,M.,Kimura,G.: "Effect of surface substances of untransformed fibroblastic cells on the adhesion and proliferation of neighboring cells:a study using fixed confluent cell sheets" Cell Struct.Funct.15. 257-262 (1990)
• [Publications] Momozaki,N.,Ogura,H.,Matsuhashi,S.,Joh,K.,Tabuchi,K.,Kimura,G.,Hori,K.: "Selective syncytium formation by murine leukemia virus in rat 3Y1 fibroblasts transformed by adenovirus type 12 or its E1A gene" Arch.Virol.115. 123-126 (1990)
• [Publications] 奥田 篤行,木村 元喜: "最新動物細胞実験マニュアル" エル・アイ・シ-, 418(63-76) (1990)
• [Publications] 谷川 孝彦,高山 寿雄,木村 元喜: "新生化学実験講座18:細胞培養技術(日本生化学会編)" 東京化学同人, 393(244-249) (1990)
• [Publications] 大野 耕策,木村 元喜: "新生化学実験構座18:細胞培養技術(日本生化学会編)" 東京化学同人, 393(255-264) (1990)