1990 Fiscal Year Annual Research Report

抗体工学に関する基礎的・応用的研究

Research Project

Project/Area Number	02205022
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	荒田洋治東京大学, 薬学部, 教授 (40011499)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	嶋田一夫東京大学, 薬学部, 講師 (70196476)
Keywords	抗体 / 抗原抗体反応 / NMR
Research Abstract	1.抗原認識部位として最小単位であるV_H,V_Lヘテロダイマ-Fv(M.W.25K)を安定かつ大量に発現することができた。 2. ^<13>Cカルボニルラベル及び ^<15>Nラベルアミノ酸をFvに導入し,ダブルラベル法により帰属を行うことができた。 3.その結果, ^1H, ^<13>C, ^<15>Nの化学シフト変化により,抗原結合に深く関与しているCDRル-プはH鎖CDR3であることがわかった。 4.分子のゆらぎを主鎖アミド ^<15>NーNMRシグナルの緩和時間(線幅)および主鎖アミドプロトンのHーD交換速度より解析した。この結果, ^<15>NーNMRシグナルの緩和時間よりFvに存在する計6本のCDRル-プの内H鎖CDR3は抗原非存在下ではゆらぎ(マルチコンフォメ-ション)をもっているが,抗原結合によりこのゆらぎがおさまることが示された。さらに,抗原がFvに結合することでH鎖CDR3の根本のHーD交換速度が著しく遅くなり,しかもV_H,V_L界面に存在する残基の交換速度にも変化がみられた。このことは,抗原結合によりCDRル-プという限定された部位の構造変化のみならず,動的構造変化という点でFv全体に変化が誘起されていることを示す。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 加藤晃一: "Complete assignment of the methionyl carbonyl carbon resonances in switch variant antiーdansyl antibodies labeled with [1ー ^<13>C]methionine" Biochemistry. 30. 270-278 (1991)
[Publications] John Lund: "A protein structural change in aglycosilated IgG3 correlates with loss of huFc RI and huFc RIII binding and/or activation" Molecular Immunology. 27. 1145-1153 (1990)
[Publications] 能勢真人: "Recombinant Fc of human IgG1 prepared in an Escherichia coli system escapes recognition by macrophages" International Immunology. 2. 1109-1112 (1990)
[Publications] 五十嵐貴子: "Structure of a mouse immunoglobulin G that lacks the entire C_Hl domain: Protein sequencing and smallーangle Xーray scattering studies" Biochemistry. 29. 5727-5733 (1990)
[Publications] 鳥越秀峰: "Sequential l_H NMR assignments and secondary structure of the B domain of staphylococcal protein A: Structural changes between the free B domain in solution and the Fcーbound B domain in crystal" Biochemistry. 29. 8787-8793 (1990)
[Publications] 松田裕生: "Proton nuclear magnetic resonance studies of the structure of the Fc fragment of human immunoglobulin Gl:Comparisons of native and recombinant proteins" Molecular Immunology. 27. 571-579 (1990)
[Publications] 荒田洋治(共編): "タンパク質III高次構造" 東京化学同人, (1990)
[Publications] 荒田洋治(分担執筆): "蛋白質の機能構造(シリ-ズ分子生物学の進歩3)" 丸善株式会社, 282 (1990)

1990 Fiscal Year Annual Research Report

抗体工学に関する基礎的・応用的研究

Principal Investigator

荒田 洋治 東京大学, 薬学部, 教授 (40011499)

Research Products

[Publications] 加藤 晃一: "Complete assignment of the methionyl carbonyl carbon resonances in switch variant antiーdansyl antibodies labeled with [1ー ^<13>C]methionine" Biochemistry. 30. 270-278 (1991)

[Publications] John Lund: "A protein structural change in aglycosilated IgG3 correlates with loss of huFc RI and huFc RIII binding and/or activation" Molecular Immunology. 27. 1145-1153 (1990)

[Publications] 能勢 真人: "Recombinant Fc of human IgG1 prepared in an Escherichia coli system escapes recognition by macrophages" International Immunology. 2. 1109-1112 (1990)

[Publications] 五十嵐 貴子: "Structure of a mouse immunoglobulin G that lacks the entire C_Hl domain: Protein sequencing and smallーangle Xーray scattering studies" Biochemistry. 29. 5727-5733 (1990)

[Publications] 鳥越 秀峰: "Sequential l_H NMR assignments and secondary structure of the B domain of staphylococcal protein A: Structural changes between the free B domain in solution and the Fcーbound B domain in crystal" Biochemistry. 29. 8787-8793 (1990)

[Publications] 松田 裕生: "Proton nuclear magnetic resonance studies of the structure of the Fc fragment of human immunoglobulin Gl:Comparisons of native and recombinant proteins" Molecular Immunology. 27. 571-579 (1990)

[Publications] 荒田 洋治(共編): "タンパク質III高次構造" 東京化学同人, (1990)

[Publications] 荒田 洋治(分担執筆): "蛋白質の機能構造(シリ-ズ分子生物学の進歩3)" 丸善株式会社, 282 (1990)

荒田洋治東京大学, 薬学部, 教授 (40011499)

[Publications] 加藤晃一: "Complete assignment of the methionyl carbonyl carbon resonances in switch variant antiーdansyl antibodies labeled with [1ー ^<13>C]methionine" Biochemistry. 30. 270-278 (1991)

[Publications] 能勢真人: "Recombinant Fc of human IgG1 prepared in an Escherichia coli system escapes recognition by macrophages" International Immunology. 2. 1109-1112 (1990)

[Publications] 五十嵐貴子: "Structure of a mouse immunoglobulin G that lacks the entire C_Hl domain: Protein sequencing and smallーangle Xーray scattering studies" Biochemistry. 29. 5727-5733 (1990)

[Publications] 鳥越秀峰: "Sequential l_H NMR assignments and secondary structure of the B domain of staphylococcal protein A: Structural changes between the free B domain in solution and the Fcーbound B domain in crystal" Biochemistry. 29. 8787-8793 (1990)

[Publications] 松田裕生: "Proton nuclear magnetic resonance studies of the structure of the Fc fragment of human immunoglobulin Gl:Comparisons of native and recombinant proteins" Molecular Immunology. 27. 571-579 (1990)

[Publications] 荒田洋治(共編): "タンパク質III高次構造" 東京化学同人, (1990)

[Publications] 荒田洋治(分担執筆): "蛋白質の機能構造(シリ-ズ分子生物学の進歩3)" 丸善株式会社, 282 (1990)