1990 Fiscal Year Annual Research Report
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02241206
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
曽我部 正博 名古屋大学, 医学部, 助教授 (10093428)
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| Keywords | 膜融合 / 膜容量 / 同時測定 / ビデオマイクロスコピィ / パッチクランプ |
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| Research Abstract |
本研究の目的は,申請者が開発中のマルチ計測光学顕微鏡を用いて,微小な膜小胞一個とパッチ膜との融合過程を,パッチクランプ下で,画像,電流,容量の各パラメ-タを同時測定して微視的な解析を行なうことである。本年度はハ-ドウェアとソフトウェア部のの完成,および膜融合の予備実験を目指してスタ-トし,以下の述べるような結果を得ることができた。
1,ハ-ドウェア
(1)ドリフトフリ-マニピュレ-タ:レ-ザ光学用のスライダと高精度直流モ-タを用い,パルス巾およびパルス高サ-ボコントロ-ルを組合わせることにより,0.1μm以下の制御精度,0.2μm/5分の安定性を有するリモ-トマニピュレ-タを製作した。(2)タイムコ-ドデコ-ダ:画像記録用テ-プに書き込まれたタイムカ-ド(SIMPIE CODE)を位相ロック回路を用いてシリアルに読み出すデコ-ダを製作した。
2,ソフトウェア
(1)画像取り込みソフト:デコ-ダからのタイムコ-ドをもとに,任意のフレ-ムから任意の問融で画像を拡張RAM上に取り込むプログラムを完成した。(2)画像デ-タ圧縮ソフト:取り込んだ画像に適当なウィンドウをかけて,重要な情報のみを抽出するプログラムを完成した。これにより,250KBの情報を1/10程度に圧縮でき,以後の処理速度が格段に向上した。
3,膜融合実験,あらかじめパッチ電極内に形成した膜小胞(〜1μmφ)とパッチ膜との融合の腕間を画像的に把えることができた。パッチ膜容量を同時測定することにより,膜小胞の容量は約0.7μF/cm^2と推定された。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Sokabe,M.: "Electrophysiological analysis of structual aspects of voltageーdependent SR K channel." Comp.Biochem.Physiol.
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[Publications] Sokabe,M.: "Quantitative videomicroscopy of patch Clamped membranes:stress,strain,capacitance,and stretch channel activation." Biophys.J.
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[Publications] Sokabe,M.: "The structure and dynamics of patch clamped membranes:A study by using differential interference light microscopy." J.Cell Biol.111. 599-606 (1990)
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[Publications] Nomura,K.: "Aminoglycoside blockade of Ca activated K channel from rat brain synaptosomal membranes incorporated into planar bilayers." J.Membr.Biol.115. 241-251 (1990)
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[Publications] Sachs,F.: "Stretch activated ion channels and membrane mechanics." Neurosci.Res.12. S1-4 (1990)
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[Publications] Ito,F.: "Effects of ions and drugs on the responses of sensory axon terminals of decapsulated frog muscle spindless." Neurosci.Res.12. S15-26 (1990)
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[Publications] Sokabe,M.: "Towards molecular mechanism of the qating in stretch activated channels.In“Comparative Aspect of Mechanoreception"(Ed.F.Ito)," Springer Verlag,
