1990 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
02304010
|
Research Institution | Sophia University |
Principal Investigator |
山上 健次郎 上智大学, 理工学部, 教授 (50011474)
|
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
横沢 英良 北海道大学, 薬学部, 教授 (90012765)
野村 晃司 都老人総合研究所, 主任研究員 (30073026)
井内 一郎 上智大学, 理工学部, 助教授 (10011694)
星 元紀 東京工業大学, 理学部, 教授 (20012411)
福島 和 (灰野 和) 東京都立大学, 理学部, 助手 (70087138)
|
Keywords | 受精 / 孵化 / 卵(黄)膜ライシン / 孵化酵素 / プロテア-ゼ / タンパク質の構造 / 卵膜 / 受精膜 |
Research Abstract |
本研究班の目的は大別して次の3点から成る。第1は海産無背椎動物,とくに原始腹足類精子でみられる非酵素性卵膜ライシンと、ホヤ精子のもつ酵素性卵膜ライシンの精製と特徴づけを行い,その作用機構を調べることである。第2は2,3の代表的動物種,たとえば哺乳類,魚類ウニ胚の分泌する孵化酵素の精製と特徴づけを行い,その作用機構を調べ、比較検討することである。第3はこれらの基質である卵膜の構造を明らかにし、基質側から卵膜溶解機構を調べてゆこうとするものである。第1の非酵素性ライシンに関しては、アワビ精子にみられるライシンは2種のタンパク成分より成ることがわかっているが、これらが共同して卵黄膜の極度の膨潤化を起す際に、卵黄膜の異った部位に作用することがわかった。このことは、第2の目的に含まれるメダカ孵化酵素成分の作用機構と類似することで極めて興味深い。すなわちメダカ孵化酵素においてもその一成分HCEがまず卵膜と結合してこれを部分分解して膨潤化し、ついで他の一成分LCEがこの膨潤化によって恐らく露出されるであろう特定の卵膜タンパク質の部位に作用して最終的にこれを分解すると考えられているのである。孵化酵素が複数種のプロテア-ゼから成ることが他の動物種では知られていないが、最近、本研究班でハツカネズミ胚から孵化に関与すると考えられるプロテア-ゼ活性を見出した。各種阻害実験から、本酵素はトリプシンに類似していることがわかってきた。第3の目的である卵膜構造に関しては、ウニ受精膜において硬化に関与すると考えられるチロシン残基由来の架橋を見出し,プルケロシンと令名した。なお、魚卵卵膜は硬化によりタンパク質の溶解性が減少するが、この硬化機構には、付活された卵膜に起る付活硬化と、単離した未硬化卵膜へのカルシウム添加によって起るカルシウム硬化とがあることがわかった。この硬化には酵素の関与が示唆されている。
|
Research Products
(8 results)
-
[Publications] Masuda,K.,I.Iuchi and K.Yamagami: "Analysis of hardening of the egg envelope (chorion) of the fish,<Oryzias>___ー <Latipes>___ー" Dev.Growth Diff. 33. 75-83 (1991)
-
[Publications] Usui,N.and K.HainoーFukushima: "Two major acrosomal proteins act on different parts of the oocyte vitelline coat in the abalone,<Haliotis>___ー <discus>___ー" Mol.Reprod.Dev.(1991)
-
[Publications] Sawada,H.,K.Yamazaki and M.Hoshi: "Trypsinーlike hatching protease from mouse embryos:Evidence for the presence in culture medium and its enzymatic properties" J.Exp.Zool.254. 83-87 (1990)
-
[Publications] Iuchi,I.,K.Masuda and K.Yamagami: "Change in component proteins of the egg envelope (chorion) of rainbow trout during hardening" Dev.Growth Diff.33. 85-92 (1991)
-
[Publications] Nomura,K.,N.Suzuki and S.Matsumoto: "Pulcherosine,a novel tyrosineーderived trivalent crossーlinking amino acid from the fertilization envelope of sea urchin embryo" Biochemistry. 29. 4525-4534 (1990)
-
[Publications] Saitoh,Y.,H.Kawahara,Miyamatsu,H.and H.Yokosawa: "Comparative studies on proteosomes (multicatalytic proteinases) isolated from spermatozoa and eggs of sea urchins" Comp.Biochem.Physiol.(1991)
-
[Publications] 浜崎 辰夫・井内 一郎・山上 健次郎: "メダカの生物学(第3章.PP28ー45)" 東大出版会, 351 (1990)
-
[Publications] 安増 茂樹・井内 一郎・山上 健次郎: "メダカの生物学(第7章,PP93ー108)" 東大出版会, 351 (1990)