1992 Fiscal Year Annual Research Report
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02404006
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
鈴木 範男 金沢大学, 理学部, 教授 (20082133)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
桜井 勝 金沢大学, 理学部, 教授 (80143874)
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| Keywords | 情報伝達 / 精子活性化ペプチド / 先体反応 / cDNA / 精子 / グアニル酸シクラーゼ / WGA結合タンパク質 / ウニ |
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| Research Abstract |
WGA結合タンパク質の部分アミノ酸配列(Val-Ser-Ser-Ile-Asp-Asn-Ile-Phe-Arg-Val-)から2種類のオリゴヌクレオチドプローブを合成し、バフンウニ精巣cDNAライブラリーから72のクローンをスクリーニングした。この中の50クローンについてEcoRI,KpnI,BamHI消化し、最もクローン数の多い2.3kbのインサートを持つクローンについて塩基配列を決定した。その結果、このクローンの総塩基数は2264で、塩基配列から予測されるタンパク質は523残基のアミノ酸で構成され、ホモロジー検策の結果、ラットのH^+-ATPaseのβ-サブユニット85%の相同性があった。また、Arbaciapunctulata及びStrongylocentrotuspurpuratus精子の膜結合性グアニル酸シクラーゼcDNAの塩基配列により、細胞外領域に対する44mer細胞内領域に対する45merのオリゴヌクレオチドプローブを作成し、これを用いてバフンウニ精巣cDNAライブラリーから6のポジテブクローンを得た。この中で最も大きいインサートcDNA(4.3kb)を持つクローンをサブクローニングし、その塩基配列を決定した。このcDNAの総塩基数は4171でこの塩基配列から予測されるタンパク質は1125残基のアミノ酸で構成されるもので、S.purpuratus精子グアニル酸シクラーゼと97.4%,A.punctulate精子グアニル酸シクラーゼと77.5%の相同性があった。さらに、ウシ網膜cGMPホスフォンジエステラーゼのcDNAの塩基配列(2163-2204)に相当する42merのオリゴヌクレオチドプローブを用いてバフンウニ精巣cDNAライブラリーから8クローンをスクリーニングし、現在これらのcDNAの塩基配列の決定を進めている。
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Research Products
(4 results)
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[Publications] katsumi Hoshino: "Differential effecsts of the egg jelly molecules FSG and SAP-I on elevation of intracellular Ca and pH in sea urchin spermatozoa" Develop.Growth and Differ.,. 34. 403-411 (1992)
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[Publications] Ken-ich Yoshino: "Sperm-activating peptide V (SAP-V),a fifth member of sperm-activating peptide family,purified from the egg-conditioned media of the heart urchin Brissrs agassizii" Comp.Biochem.Physiol.,. 102B. 691-700 (1992)
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[Publications] Norio Suzuki: "Relationship between the amino acid sequences of sperm-activating peptides and taxomoy of the echinoids" Comp.Biochem.Physiol.,. 102B. 679-690 (1992)
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[Publications] Ken-ichi Yoshino: "Two classes of receptors specific for sperm-activating peptide type-III in sand dollar spermatozoa" Eur.J.Btochem,. 206. 887-893 (1992)
