1990 Fiscal Year Annual Research Report
宿主ー病原菌の特異性と動的抵抗性遺伝子群の発現調節
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02404012
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
奥 八郎 岡山大学, 農学部, 教授 (20033144)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
一瀬 勇規 岡山大学, 農学部, 助教授 (50213004)
山田 哲治 岡山大学, 農学部, 助教授 (00191320)
白石 友紀 岡山大学, 農学部, 助教授 (10033268)
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| Keywords | エンドウ / フェニ-ルアラニン・アンモニアリア-ゼ / PAL遺伝子 / カルコン合成酵素 / CHS遺伝子 / 遺伝子発現調節 / 動的抵抗性遺伝子 |
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| Research Abstract |
1.<エンドウPAL、CHSーcDNAの構造解析>___ー
PALーcDNA(2.6kb)の全塩基配列を決定したところ、分子量80kDaのタンパクをコ-ドしていることが判明し、また塩基配列から導かれるアミノ酸残基配列では、インゲン、サツマイモ、イネ、パセリなどのPALと70ー90%の相同性を示した。また同様に、CHSーcDNAの塩基配列では他植物のCHSと80%以上の相同性を示した。
2.<エンドウ・ゲノミックPAL、CHS遺伝子の構造解析>___ー
現在、2種類のPALゲノム遺伝子が単離されており、構造遺伝子とその上流領域を含む約5kbの塩基配列を決定したところ、gPALー1は全長が3.1kb,gPALー2は2.6kbであり、それぞれ0.6kb,0.1kbのイントロンが一つずつ存在していた。また、gPALー1のエキソンI、エキソンIIとcDNAの塩基配列は一致していたこと、またgPALー1の5'側上流制御領域にはエリシタ-の誘導を受ける他植物のCHSやPAL遺伝子に共通したモチ-フがみられることからgPALー1はエリシタ-によって誘導をうける遺伝子であると推測される。また同様に、CHSゲノム遺伝子を解析したところ、5種類のメンバ-が同定され、現在塩基配列を決定している。
3.<エンドウ・トランンジエントアッセイ系の確立と遺伝子導入>___ー
CATをレポ-タ-遺伝子として、エンドウのプロトプラストを用いたトランジエントアッセイ系を確立し、現在PCR法でgPALー1,gPALー2の5'側上流の制御領域DNA断片を合成し、どの領域がエリシタ-やサプレッサ-による発現制御に必要なのかを調べている。
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[Publications] Yoshioka,et al.: "Suppression of pisatin production and ATPase activity in pea plasma membranes by orthovanadate,verapamil and a suppressor from Mycosphaerella pinodes." Plant Cell Physiology. 31. 1139-1146 (1990)
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[Publications] Shiraishi,et al.: "Suppression of pisatin accumulation by an inhibitor of protein kinase" Ann.Phytopath.Soc.Japan. 56. 261-264 (1990)
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[Publications] Kawamata,et al.: "Cloning of phenylalanine ammoniaーlyase gene from Pisum sativum and regulation by fungal pathogenicity factor." Pro.Natl.Sci.Acad.
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[Publications] T.Shiraishi,et al (collaboration): "Molecular Strategies of Pathogens and Host Plants" SpringerーVerlag,New York, (1991)
