1991 Fiscal Year Annual Research Report
宿主ー病原菌の特異性と動的抵抗性遺伝子群の発現調節
Project/Area Number |
02404012
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Research Institution | Okayama University |
Principal Investigator |
奥 八郎 岡山大学, 農学部, 教授 (20033144)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
一瀬 勇規 岡山大学, 農学部, 助教授 (50213004)
山田 哲治 岡山大学, 農学部, 助教授 (00191320)
白石 友紀 岡山大学, 農学部, 助教授 (10033268)
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Keywords | サプレッサ- / エリシタ- / Mycosphaerella pincdes / Pisum sativum(エンドウ) / シグナル伝達 / PAL(フェニ-ルアラニン、アンモニア、リア-ビ) / CHS(カルコン合成酵素) |
Research Abstract |
1.エンドウPSPAL1,PSPAL2遺伝子の器官特異的発現と各種シグナル物質による発現調節PAL1,PAL2両遺伝子の5^1ーnoncoding領域に含まれる特異的配列を用いて、逆転写酵素を用いた転写開始点決定を行ったところ、両遺伝子とも、エリシタ-によって発現誘導を受け、また、エンドウ植物個体の各器官におけるPAL1,PAL2転写産物の蓄積量をノ-ザンブロットハイブリダイゼ-ションにより解析したところ、両遺伝子の転写産物とも、根や茎での蓄積量が高く、その他の器官、例えば葉、蔓、花の各器官ではPAL1,PAL2とも全く蓄積が確認されなかった。これらの結果は、PAL1,PAL2遺伝子発現調節領域にはエリシタ-誘導に加え、根組織特異的発現を調節するシス・エレメントが存在することを示唆している。(本実験では、高速遠心分離器、DNA増幅器を使用した)。さらに、種々の長さに削ったPAL1遺伝子のプロモ-タ活性をCAT(Chloramphenicol acetyl transferase)遺伝子をレポ-タ-遺伝子として、エンドウの培養細胞由来のプロトプラストにエレクトロポレ-ションし、transientなCATの発現を比較したところ、ー340からー140までの上流領域にエリシタ-によって転写誘導を受け、オルトバナジン酸(原形質膜ATPaseの阻害剤)により抑制される発現調節に必要なシス因子が存在することが明らかとなった(蛍光光度分光計を使用)。 2.CHS遺伝子に関する解析エンドウのCHS遺伝子については1)3種の主要な分子種が存在すること、2)このうちの主要な2種のCHS遺伝子(PSCHS1,PSCHS2)がゲノム上にタンデムに並んで存在していること、また3)上述のTransientアッセイによってこの2つのCHS遺伝子はPSPAL遺伝子に比べるとCATの発現レベルが高く、正の調節に関するシスエレメントをもつことが示唆された。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] Hashimoto,T.et al.: "Transient expression of phenylalanine ammoniaーlyase promoter in electroporated pea protoplasts." Plant Cell Reports.
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[Publications] Ichinose,Y.et al.: "Molecular cloning of chalcone synthase cDNAs from Pisum sativum." Plant Molecular Biology.
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[Publications] Yoshioka,H.et al.: "Orthovanadate suppresses an accumulation of phenylalanine ammoniaーlyase mRNAs and chalcone synthase mRNA in pea epicotyls that is induced by an elicitor from Mycosphaerella pinodes." Plant Cell Physiology.
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[Publications] Yamada,T.et al.: "Organーspecific expression and suppression of pea phenylalanine ammoniaーlyase genes by a plasma menbarane ATPase inhibitor,orthovanadate." Plant Journal.
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[Publications] Toyoda,K.et al.: "Regulation of phosphoinositide metabolism in pea plasma membrane by elicitor and suppressor from a pea pathogen,Mycosphaerella pinodes." Plant Cell Physiology.
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[Publications] Nasu,K.et al.: "Suppression in constituent of Pisum sativum for defense response." Plant Cell Physiology.
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[Publications] Oku,H.: "Molecular Signals in PlantーMicrobe Communication" CRC Press, 15 (1992)
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[Publications] Shiraishi,T.et al.: "Molecular Strategies of Pathogens and Host Plants" SpringerーVerlag, 12 (1991)