1990 Fiscal Year Annual Research Report

細胞間相互作用に基く誘導性分化の光学的画像解析による研究ーホヤ単離胚細胞系における分化の細胞内機序ー

Research Project

Project/Area Number	02404021
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	高橋國太郎東京大学, 医学部(医), 教授 (10010034)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	岡村康司東京大学, 医学部(医), 助手 (80201987)
Keywords	細胞間相互作用 / 誘導性神経分化 / 画像解析 / イオンチャネル / ホヤ初期胚割球 / 異常整流性Kチャネル / ルシフェラ-ゼ遺伝子
Research Abstract	ホヤ分裂抑制8細胞胚の動物半球頭側割球は予定神経領域を含むが、単離して培養すると表皮型に分化することが分っている。しかし、64細胞期から112細胞期にあたる時期で8細胞胚植物半球頭側割球と接着して培養するか、蛋白分解酵素処理を行なうとこの動物半球頭側割球は神経型分化に誘導される。この神経型に誘導された動物半球頭側割球に誘導時の前後で転写の特異的阻害剤であるαーamanitinを注入する実験を行った。その結果、異常整流性Kーchannelは神経型分化と表皮型分化の分離を示す最も初期のマ-カ-となること、またその変化は神経誘導時に起る恐らくKチャネル遺伝子の転写阻害にあることが示唆された。また、チャネル遺伝子の他の膜機能分子についてもこのKチャネル発現の変化と前後して発現変化を示すものを検索したところ、細胞間連絡の機能分子ギャップ結合チャネルの発現が神経誘導により抑制され、表皮分化のときは増強されることが示された。現在この現象がKチャネルの場合と同様に転写活性の変化に原因するか否かを調べている。cDNAクロ-ニングは、米国ニュ-ヨ-ク州立大学のG.Mandel博士との協同実験によって技術的な側面からの支援があり、岡村がPCR法を用いホヤcDNAライブラリ-より2種のNaチャネル遺伝子クロ-ンと考えるものを分離した。またBio Rad製共焦点顕微鏡は申請したMRCー500と異り、蛍光感度が4倍に改良されたMRCー600を購入し、現在Fluoー3を用いて正常胚の嚢胚期における予定神経領域における細胞内Caイオン濃度測定を行っている。またルシフェラ-ゼ遺伝子mRNAを精製し、割球内に注入して冷却型CCDカメラにより発光を画像化する実験を進めている。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Okado,H.: "Differentiation of membrane excitability in isolated cleavageーarrested blastomeres from early ascidian embryos." J.Physiol.Lond.427. 583-602 (1990)
[Publications] Okado,H.: "Induced neuralーtype differentiation in the cleavageーarrested blastomere isolated from early ascidian embryos." J.Physiol.Lond.427. 603-623 (1990)
[Publications] Okado,H.: "Regional specificity of neural differentiation in ascidian ectodermal blastomeres and a possible mechanism of neural induction." Jpn.J.Physiol.40 Suppl.S106 (1990)
[Publications] Okamura,Y.: "Changes in sodium channels during neural differentiation in the isolated blastomere of the ascidian embryo." J.Physiol.Lond.431. 39-74 (1990)
[Publications] Okamura,Y.: "Inactivation kinetics of the sodium channel in the egg and the isolated,neurally differentiated blastomere of the ascidian." J.Physiol.Lond.431. 75-102 (1990)
[Publications] Okamura,Y.: "Suppression of transcription of inwardーrectifier K^+ channel by neural induction in ascidian embryos." Neuroscience Res.Suppl.11. S36 (1990)

1990 Fiscal Year Annual Research Report

細胞間相互作用に基く誘導性分化の光学的画像解析による研究ーホヤ単離胚細胞系における分化の細胞内機序ー

Principal Investigator

高橋 國太郎 東京大学, 医学部(医), 教授 (10010034)

Research Products

[Publications] Okado,H.: "Differentiation of membrane excitability in isolated cleavageーarrested blastomeres from early ascidian embryos." J.Physiol.Lond.427. 583-602 (1990)

[Publications] Okado,H.: "Induced neuralーtype differentiation in the cleavageーarrested blastomere isolated from early ascidian embryos." J.Physiol.Lond.427. 603-623 (1990)

[Publications] Okado,H.: "Regional specificity of neural differentiation in ascidian ectodermal blastomeres and a possible mechanism of neural induction." Jpn.J.Physiol.40 Suppl.S106 (1990)

[Publications] Okamura,Y.: "Changes in sodium channels during neural differentiation in the isolated blastomere of the ascidian embryo." J.Physiol.Lond.431. 39-74 (1990)

[Publications] Okamura,Y.: "Inactivation kinetics of the sodium channel in the egg and the isolated,neurally differentiated blastomere of the ascidian." J.Physiol.Lond.431. 75-102 (1990)

[Publications] Okamura,Y.: "Suppression of transcription of inwardーrectifier K^+ channel by neural induction in ascidian embryos." Neuroscience Res.Suppl.11. S36 (1990)

高橋國太郎東京大学, 医学部(医), 教授 (10010034)