1991 Fiscal Year Annual Research Report

細胞間相互作用に基く誘導性分化の光学的画像解析による研究

Research Project

Project/Area Number	02404021
Research Institution	University of Tokyo
Principal Investigator	高橋國太郎東京大学, 医学部(医), 教授 (10010034)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	岡戸晴生東京大学, 医学部(医), 助手 (60221842) 岡村康司東京大学, 医学部(医), 助手 (80201987)
Keywords	神経分化 / 細胞間相互作用 / 〔Ca^<2+>〕i / チロシンキナ-ゼ受容体 / ギャップ結合 / Naチャネルクロ-ン / 共焦点顕微鏡
Research Abstract	マボヤ・アカボヤの分裂抑制8細胞胚から単離した動物半球頭側割球a_<4ー2>は、(1)幼生の予定神経域を含むが,単独培養すると表皮型細胞に分化し、(2)正常胚の襄胚初期の時点での(a)予定脊索割球A_<4ー1>との接着、あるいは(b)蛋白分解酵素処理により神経型細胞に分化する。誘導時点における細胞内情報伝達機構を明らかにする目的で、割球a_<4ー2>の細胞内Caイオン動態を光学的に計測したところ、神経誘導と積極的に関連するCaイオン濃度の上昇は見られず、Caイオン以外のAキナ-ゼ、Cキナ-ゼ等の活性化因子をもちいて実験を行ったが、これらキナ-ゼの関与も証明できなかった。しかし細胞増殖、分化などに対する作用によって最近注目されているチロシンキナ-ゼ受容体については、塩基性FGFがこのa_<4ー2>割球の神経化に有効で、その受容体の関与が示唆された。また細胞間相互作用の一つの要因として早くから注目されている胚細胞間にみられる強力なギャップ結合チャネルの動態も、単離a_<4ー2>・A_<4ー1>割球系を用いて光学的手法を利用して解析したところ、誘導性分化の要因というよりも結果としての結合の消失が明らかとなった。転写活性を定量的に解析するために、神経分化にともなって特異的に発現する分化型Naチャネルのクロ-ニングを行い成功した。このNaチャネルmRNA発現の胚における空間分布とその神経誘導時点における細胞間相互作用の関連を解析する目的で、まず8細胞胚の時点でa_<4ー2>割球およびA_<4ー1>割球にそれぞれ異なる細胞系統マ-カ-となる蛍光色素を注入、正常胚における予定神経域すなわち被誘導割球である動物半球頭側割球a_<4ー2>の細胞系統と予定脊索領域すなわち誘導割球である植物半球頭側割球A_<4ー1>の細胞系統との接着状況を共焦点顕微鏡を用いて観察した。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Shidara,M.: "Developmental changes in delayed rectifier K^+ currents in the muscular^- and neuralーtype blastomere of ascidian embryos." Journal of Physiology. 443. 277-305 (1990)
[Publications] Okamura,Y.: "Regulation of sodium channels in developing tunicates." Biophysical Journal. 59. 391a (1991)
[Publications] Takahashi,K.: "Induction of neural membrane in cleavageーarrested ectodermal blastomeres isolated from the ascidian early embryo." Biomedical Research 12,Suupl.2. 195-196 (1991)
[Publications] Saitoh,M.: "Gap junctional communication during neural and epidermal differentiation in cleavageーarrested 8ーcell blastomeres." Japanese Journal of Physiology. 41. S61 (1991)
[Publications] 高橋國太郎: "受精卵・細胞膜の初期分化" 新生理科学体系7、発生・分化の生理学(野々村禎昭、小幡邦彦編)医学書院. 7. 108-119 (1991)
[Publications] 岡村康司: "誘導性神経分化とNaチャネルの発現" 実験医学. (1992)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

細胞間相互作用に基く誘導性分化の光学的画像解析による研究

Principal Investigator

高橋 國太郎 東京大学, 医学部(医), 教授 (10010034)

Research Products

[Publications] Shidara,M.: "Developmental changes in delayed rectifier K^+ currents in the muscular^- and neuralーtype blastomere of ascidian embryos." Journal of Physiology. 443. 277-305 (1990)

[Publications] Okamura,Y.: "Regulation of sodium channels in developing tunicates." Biophysical Journal. 59. 391a (1991)

[Publications] Takahashi,K.: "Induction of neural membrane in cleavageーarrested ectodermal blastomeres isolated from the ascidian early embryo." Biomedical Research 12,Suupl.2. 195-196 (1991)

[Publications] Saitoh,M.: "Gap junctional communication during neural and epidermal differentiation in cleavageーarrested 8ーcell blastomeres." Japanese Journal of Physiology. 41. S61 (1991)

[Publications] 高橋 國太郎: "受精卵・細胞膜の初期分化" 新生理科学体系7、発生・分化の生理学(野々村禎昭、小幡邦彦編)医学書院. 7. 108-119 (1991)

[Publications] 岡村 康司: "誘導性神経分化とNaチャネルの発現" 実験医学. (1992)

高橋國太郎東京大学, 医学部(医), 教授 (10010034)

[Publications] 高橋國太郎: "受精卵・細胞膜の初期分化" 新生理科学体系7、発生・分化の生理学(野々村禎昭、小幡邦彦編)医学書院. 7. 108-119 (1991)

[Publications] 岡村康司: "誘導性神経分化とNaチャネルの発現" 実験医学. (1992)