1990 Fiscal Year Annual Research Report
| Project/Area Number |
02454015
|
|---|
| Research Institution | The University of Tokyo |
|---|
Principal Investigator |
長田 敏行 東京大学, 理学部, 教授 (10012519)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
網野 真一 東京大学, 理学部, 助手 (30191860)
高橋 陽介 東京大学, 理学部, 助手 (90183855)
|
|---|
| Keywords | オ-キシン / タバコ / プロトプラスト / 遺伝子発現制御 / エレクトロポレ-ション / プロモ-タ- / オ-キシン結合タンパク質 |
|---|
| Research Abstract |
タバコ葉肉プロトプラストの培養初期から単離したオ-キシンで誘導される遺伝子parのcDNAを用いて、タバコゲノムライブラリ-よりpar遺伝子のゲノムDNAを単離したが、この遺伝子は読み枠にイントロンを一つ持っていた。プロモ-タ-を単離することが出来たので、このプロモ-タ-をレポ-タ-遺伝子ベ-タグルクロニダ-ゼにつないだプラスミドを調製し、葉肉プロトプラストに改良したエレクトロポレ-ション法で導入したところオ-キシンに応答したGUS活性を検出することができたが、これは最初の報告であった。従って、更にシス領域を限定するためプロモ-タ-を削ってプロトプラストへ導入したところ、プロモ-タ-上の111 bpにほぼ同定できた。
par遺伝子は、ダイズのGmhsp26ーAとホモロジ-があることがわかったが、カドミウムで誘導されることは共通であったが、preーmRNAからイントロンの除去は正常に進行し、温度ショックで誘導がかからないなど異なった点が多く、祖先は共通であるが異なった方向に分化したものと推定した。大腸菌のsspとのホモロジ-は低いが、類似のアミノ酸で比較すると両者は極めて良く似ているのでpar遺伝子もsspと似た機能をしているものの推定された。
また、タバコ葉の膜分画に、トウモロコシで詳しく調べられた21kのオ-キシン結合タンパク質abpに免疫学的に同一の22kのabpがあり、細胞の表層でオ-キシンの信号伝達に関与しているという可能性を示すデ-タも得られたが、このタンパク質の機能についてはまだ今後の研究が必要である。
|
Research Products
(5 results)
-
[Publications] Yohsuke Takahashi: "Location of the cisーacting auxinーresponsive region in the promoter of the <par>___ー gene from tobacco mesophyll protoplasts" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 8013-8016 (1990)
-
[Publications] Seiichiro Hasezawa: "Dynamic organization of plant microtubules at the three distinct transition points during the cell cycle progression of synchronized tobacco BYー2 cells" Botanica Acta. 104. (1991)
-
[Publications] Toshiyuki Nagata: "Tobacco BYー2 cell line as the ‘HeLa' cell in the cell biology of higher plants" International Review of Cytology.
-
[Publications] Yohsuke Takahashi: "Characterization of the auxinーregulated <par>___ー gene from tobacco mesophyll protoplasts" The Plant Journal.
-
[Publications] Yutaka Takeda: "The replication origin of proplastid DNA in tobacco cultured cells" The EMBO Journal.
