1991 Fiscal Year Annual Research Report
テトラヒメナの分裂停止突然変異株を利用した細胞分裂の分子機構の解析
Project/Area Number |
02454020
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Research Institution | University of Tsukuba |
Principal Investigator |
渡邉 良雄 筑波大学, 生物科学系, 教授 (00015918)
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Keywords | テトラヒメナ / 細胞分裂 / 分裂停止突然変異 / 収縮環 / アクチン / プロフィリン / DNA複製 / EFー1α |
Research Abstract |
本年度は,第1に,分裂面決定因子である分裂停止突然変異株cdaAの変異遺伝子産物のp85が細胞質分裂の主役である収縮環微小繊維形成の重合核として,細胞周期の何時役割を演じるかについて検討した。細胞周期の種々の時期にテトラヒメナ・アクチンのアナログとなる骨格筋アクチンを注射したところ、非機能的な収縮環がp85を核としてできあがり、特定の時期にのみ長期にわたる分裂停止が誘導されることが判り、それは分裂溝形成直前の17分間に限られることが明らかになり、p85の分裂予定赤道面に配列する時期と一致することが判った。 第2は,細胞分裂が収縮環微小繊維の収縮と同時に繊維の脱重合を起しながら進行することが示唆されてきたが,その実体は殆んど明らかにされてこなかった。我々は,アクチン繊維の脱重合因子であるプロフィリンをテトラヒメナで同定し,性状を調べ,かつ,分裂溝の収縮環アクチン微小繊維と共存することをつきとめた。収縮環の収縮と繊維の脱重合にプロフィリンが果す役割を検討するため、免疫電顕及び抗プロフィリン抗体注射などの実験を行っている。 第3には,テトラヒメナの中間径繊維蛋白質と相互作用する49kalの蛋白貭がユ-プロテスのDNA複製バンドに特異的に局在することが判明した。この蛋白質の遺伝子を単離して配列を調べたところ、EFー1αと酷似していることが判り、興味深い研究に継がる可能性が示された。EFー1αは蛋白合成伸長因子であるばかりでなく,ファ-ジQβのDNA複製因子として,また極く最近,アクチン微小繊維や微小管を束ねる因子らしいことも示唆されるようになってきた。これらのことに基づいてDNA複製におけるEFー1αの役割やcdaCの変異遺伝子産物とEFー1αとの関係を今後検討したい。
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Research Products
(7 results)
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[Publications] Ohba,H.,Hirono,M.,Edamatsu,M.and Watanabe,Y.: "Timing of formation of Tetrahymena contractile ring microfilaments investigated by inhibition with skeletal muscle actin." Developmental Genetics. (1992)
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[Publications] Kimura,M.,Hirono,M.,Takemase,T.and Watanabe,Y.: "Drastic change in the level of actin mRNA in the course of synchronous division in Tetrahymena." Journal of Biochemistry. 109. 399-403 (1991)
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[Publications] Edamatsu,M.,Hirono,M.and Watanabe,Y.: "The primary structure of Tetrahymena profilin." Biochem.Biophys.Res.Commun.175. 543-550 (1991)
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[Publications] Numata,O.,Takagi,I.,Fuーchan,J.,Takahashi,M.,Kosaka,T.,and Watanabe,Y.: "Antibodies against Tetrahymena 14ーmm filamentーforming protein recognize the replication land in Euplotes." Exptal.Cell Res.193. 183-189 (1991)
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[Publications] Numata,O.,Takagi,I.,Hirano,M.,Takemase,T.and Watanabe,Y.: "Tetrahymena 14ーmm filamentーforming protein has citrate synthase activity." Biochem.Biophys.Res.Commun.175. 1028-1034 (1991)
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[Publications] Takagi,I.,Numata,O.,Sugai,T.and Watanabe,Y.: "Involvement of 14ーmm filament forming protein and tubulin in gametic pronuclear behavior during conjugation in Tetrahymena." Journal of Protozoology. 38. 345-351 (1991)
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[Publications] Takemasa,T.,Takagi,N.and Watanabe,Y.: "Calciumーbinding proteins from Tetrahymena.In Novel CalciumーBinding Proteins.Fundamentals and Clinical Implications.,ed.by C.W.Heizman,Chapter26" Springer Press, 481-495 (1991)