1991 Fiscal Year Annual Research Report
果実の分化、生長におけるオ-キシンリセプタ-の役割
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02454046
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
山木 昭平 名古屋大学, 農学部, 教授 (70210341)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大野 始 名古屋大学, 農学部, 助手 (20126840)
手塚 修文 名古屋大学, 農学部, 助教授 (10109316)
酒井 慎吾 筑波大学, 生物科学系, 助教授 (60033388)
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| Keywords | オ-キシン / IAA / オ-キシン結合蛋白質 / プロトプラスト / メロン / リンゴ / シンビジウム |
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| Research Abstract |
リンゴ実生から、2,4ーD linkedーSepharose4Bを用いたアフィニティ-クロマトグラフィ-および2回のSepharose4Bゲル濾過によりオ-キシン結合蛋白質を約1万分の1に部分精製し、その性質を調べた。部分精製オ-キシン結合蛋白質のSepharose4Bゲル濾過による分子量は約400KDaであり、このゲル濾過における活性パタ-ンと対応する56KDaと15KDaのバンドがSDSーPAGE上に検出された。アフィニティ-クロマトグラフィ-後、SDSーPAGE上で65KDaのバンドがメインバンドとして強調されたが、メロン同様活性パタ-ンとは対応しなかった。分子量及び考えられるサブユニット構成から、リンゴ実生の可溶性オ-キシン結合蛋白質はヤエナリABPー1と似ていた。上記方法によって得られた部分精製オ-キシン結合蛋白質を用い、受容体としての性質を検討したところ、スカッチャ-ドプロットは直線を示し、そこから求められた難離定数は7.7X10^<ー6>Mであった。これまでヤエナリ、メロンおよび本実験において精製された可溶性オ-キシン結合蛋白質の解離定数はいずれも10^<ー6>Mのオ-ダ-であり、明らかに膜結合型と異なっており、可溶性型の特徴の一つと考えられる。 ^<14>CーIAA結合に対する阻害率は2,4ーD,NAAがほぼ100%でアンチオ-キシンであるPCIBが約50%であり、この部分精製標品はオ-キシンに高い親和性を持つことを明かにした。このように、リンゴ実生からのオ-キシン結合蛋白質は基質に対する結合の飽和性、結合の可逆性そして特異性を示すことより、オ-キシンに対する受容体としての性質を持つことを明らかにした。
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[Publications] Yamaki,S.and Asakura,T.: "Stimulation of the uptake of sorbitol into vacuoles from apple fruit flesh by abscisic acid and into protoplast by indoleacetic acid" Plant Cell Physiology. 32. 315-318 (1991)
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[Publications] MurakamiーMizukami,Y.Yamamoto,Y.and Yamaki,S.: "Analyses of indole acetic acid and abscisic acid contents in nodules of soybean plants bearing VA mycorrhizas" Soil Sci.Plant Nutr.37. 291-298 (1991)
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[Publications] Ohno,H.and Kako,S.: "Roles of floral organs and phytohormones in flower stalk elongation of Cymbidium (Orchidaceae)" J.Japan.Soc.Hort.Sci.60. 159-165 (1991)
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[Publications] Sakai,S.: "Reguratory functions of soluble auxinーbinding proteins" International Review of Cytology. 135. 765-773 (1992)
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[Publications] Sakai,S.: "Purification of a soluble cytokininーbinding protein from etiolated mung bean seedlings" Biosci,Bioteck,Biochem. 56. 504-507 (1992)
