新しいカルシウム結合蛋白質visininの機能に関する研究

1991 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 02454135
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 三木 直正 大阪大学, 医学部, 教授 (40094445)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大杉 武 大阪大学, 医学部, 助手 (50176880)
• Keywords: ビジニン / cDNAクロ-ニング / 網膜 / 松果体 / 光 / カルシウム / グアニレ-トサイラ-ゼ

Research Abstract

Visininは、網膜錐体細胞に特異的な24kDaの蛋白質として、1985年に我々が見いだしたものである。前年度は、visinin cDNAのクロ-ングについて報告した。今回は、visininの機能の検索と,visinin遺伝子上流のクロ-ニングを試みた。
1、Guanylate cyclase(GC)活性への影響
1)visinin抗体:Visininの機能を調べるために、カエルの網膜から桿体細胞外節を調整し、そのGC活性を測定した。GC活性は、Yamasa社のcGMPアッセイキットを用いた。GC活性はvisinin抗体添加によりにより抑制されなかった。
2)Visinin蛋白質:大腸菌にvisininを発現させ、これを部分精製し、GC活性への影響を調べたが、活性に変化は見られなかった。
3)Visininとホモロジ-のあるカルシウム結合蛋白質として、ウシ網膜桿体細胞に存在するRecoverin(A.M.Dizhook et al.Science 251,915ー918,1991.)が報告された。Recoverinは、カルシウム非存在下でGC活性を抑制し、カルシウム存在下でGC活性を抑制する。
4)Visininは、錐体細胞に存在するので、recoverinとは少し作用機作が異なるのかも知れない。
2、Visinin遺伝子の上流の解析:ニワトリゲノムライブラリ-よりvisinin cDNAを用いて、上流遺伝子のクロ-ニングを行っている(進行中)。
3、松果体のvisininは、ふ卵後、光照射により誘導(4ー8倍)される。これはニワトリの眼球摘出でも誘導されるので、visininの誘導は網膜を介すさず、頭蓋からの松果体への直接の作用と考えられた。

Research Products

• [Publications] K.Goto,K.Yamagata,N.Miki,and H.Kondo: "Direct photosensitivity of chick pinealocytes as demonstrated by visininーimmunoreactivity." Cell Tissue Res.262. 501-505 (1990)
• [Publications] K.Yamagata,K.Goto,CーH.Kuo,H.Kondo,and N.Miki,: "Visinin;A novel calciumーbinding protein expressed in retinal cone cells." Neuron.2. 469-476 (1990)
• [Publications] 郭 哲輝,山形 要人,三木 直正: "網膜視細胞の光情報処理系と特異蛋白質" 生化、. 62. 1-17 (1990)
• [Publications] 三木 直正、: "色覚異常の分子機構、" 日眼会誌、. 95. 1196-1205 (1991)