1990 Fiscal Year Annual Research Report
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02454521
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| Research Institution | Jichi Medical University |
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Principal Investigator |
斎藤 政樹 自治医科大学, 医学部, 教授 (60012762)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
古川 雄祐 自治医科大学, 医学部, 助手 (00199431)
中村 充 自治医科大学, 医学部, 助手 (20198237)
大田 雅嗣 自治医科大学, 医学部, 講師 (90160514)
北川 誠一 自治医科大学, 医学部, 助教授 (50133278)
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| Keywords | 自律増殖能 / インタ-ロイキン(ILー1,ILー3) / 増殖因子(非)依存性 / オ-トクリン(Autocrine)機構 / 癌関連抗原ガングリオシドGD3 / 細胞融合法 / 高電圧パルス法 / エレクトロポレ-ション(Electroporation)法 |
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| Research Abstract |
平成2年度は以下の研究結果を得た:(1)増殖因子(ILー3,GMーCSF,GーCSF)依存性のマウス骨髄系白血病細胞株NFSー60細胞から、ILー3のみに特異的に依存して増殖する亜株1ー7細胞をクロ-ニングした。この1ー7細胞に、Electroporation法でILー3遺伝子を外来性に導入することによって、増殖因子依存性から非依存性に転換し自律増殖能を獲得した新たな複数の細胞株を樹立した。樹立された全ての細胞株において、導入された外来性ILー3遺伝子のコピ-数は単一であるが、ILー3蛋白質の分泌能には細胞株間で大きな相違が認められた。これに比し、細胞内ILー3蛋白濃度にはそれほどの差異が見られないことから、自律増殖能獲得は、通常の外分泌された増殖因子によるAutocrine機構ではなく、細胞内ILー3がより重要な働きをしている新しい機構の可能性が示唆された。また自律増殖能を獲得した細胞株全てに共通して、NFSー60親細胞には認められない癌特異性の高い糖脂質ガングリオシドGD3(癌関連抗原)が特徴的に出現していることを発見した。これはAntiーGD3単クロ-ン抗体による薄層クロマトImmunostaining法で確認された。同時に、この増殖因子非依存性細胞株がヌ-ドマウス移植系において強い造腫瘍性を示し、高い悪性度をもつ細胞に転換していることが判明した。(2)本研究者らが樹立したヒト急性骨髄単球性白血病由来の細胞株JOSKーIは、無刺激状態で持続的に高単位のILー1を自己産生し、細胞増殖がAutocrine的に促進されることを明らかにした。またJOSKーI細胞がILー1と同時にILー1 inhibitorを産生していることが判明し、このinhibitorの精製、性質を解析した。分子量25kD、等電点5.5で、胸腺細胞や脾細胞の増殖も抑制するが、TGFβ活性は認められない。(3)ヒト白血病細胞株Uー937細胞と正常単球或いはリンパ球とのハイブリッド細胞を作成するため、高電圧パルス法による細胞融合法の効率よい条件設定を検討した。
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[Publications] <M.Saito>___ー,H.Nojiri,H.Ogino,A.Yuo,H.Ogura,M.Itoh,K.Tomita,T.Ogawa,Y.Nagai,and S.Kitagawa.: "Synthetic SialylーGlycolipids(SialoーCholesterol and SialoーDiglyceーride) Induce Granulocytic Differentiation of Human Myelogenous Leukemia Cell Line HLー60." FEBS Lett.271. 85-88 (1990)
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[Publications] M.Akashi,A.H.Loussararian,D.C.Adelman,<M.Saito>___ー,and H.P.Koeffler: "Role of Lymphotoxin in Expression of Interleukin 6 in Human Fibroblasts." J.Clin.Invest.85. 121-129 (1990)
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[Publications] A.Yuo,S.Kitagawa,A.Ohsaka,<M.Saito>___ー,and F.Takaku.: "Stimulation and Priming of Human Neutrophils by Granulocyte Colonyーstimulating Factor and Granulocyteーmacrophage Colonyーstimulating Factor:Qualitative and Quantitative Differences." Biochem.Biophys.Res.Commun.171. 491-497 (1990)
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[Publications] M.Nakamura,K.Kirito,J.Yamanoi,T.Wainai,H.Nojiri,and <M.Saito>___ー.: "Ganglioside GM3 Can Induce Megakaryocytic Differentiation of Human Leukemia Cell Line K562 Cells." Cancer Res.51. (1991)
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[Publications] N.Yanai,M.Yamada,K.Motoyoshi,H.Yokota,K.Yoshida,M.Saito,T.Kawashima,M.Nishida,Y.Miura,<M.Saito>___ー,and F.Takaku.: "Effect of Human Macrophage Colonyーstimulating Factor on Granuloーpoiesis and Survival in BoneーMarrowーtransplanted Mice." Jpn.J.Cancer Res.81. 355-362 (1990)
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[Publications] S.Suzu,N.Hanai,M.Saito,T.Kawashima,T.Kasahara,<M.Saito>___ー,F.Takaku,and K.Motoyoshi.: "Enhancement of the Antibodyーdependent Tumoricidal Activity of Human Monocytes by Human Monocyte Colonyーstimulating Facter." Jpn.J.Cancer Res.81. 79-84 (1990)
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[Publications] <斎藤 政樹>___ー: "白血病の分化誘導療法ー基礎から臨床へ(穂積 本男、斎藤 政樹、永田 和宏編著)" 中外医学社、東京, 218 (1990)
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[Publications] <斎藤 政樹>___ー: "新生化学実験講座4、脂質111、糖脂質(村松正実、永井克孝編)" 東京化学同人、東京, 12 (1990)
