1991 Fiscal Year Annual Research Report

新規Cl^-感受性蛍光色素による細胞内Cl^-濃度の多点経時変化測定法の開発と応用

Research Project

Project/Area Number	02557012
Research Institution	Kansai Medical University
Principal Investigator	稲垣千代子関西医科大学, 医学部, 教授 (60025640)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	瓜生斗支子関西医科大学, 医学部, 助手 (40203608) 原満良関西医科大学, 医学部, 助手 (50192282) 井上雅史関西医科大学, 医学部, 助手 (90203257) 大谷ひとみ関西医科大学, 医学部, 助手 (40140272) 大森京子関西医科大学, 医学部, 講師 (90152256)
Keywords	クロライドイオン / Cl^-感受性蛍光色素 / 海馬神経細胞 / 角膜内皮細胞
Research Abstract	本年度研究実施計画に添って実験を進め、次の成果を得た。海馬神経細胞 1)初代培養ラット海馬錐体神経細胞にクロライドイオン感受性蛍光色素MQAEを負荷し、細胞内クロライドイオン濃度の変化を顕微蛍光測光法により観察した。 2)クロライドイオンポンプ阻害剤であるエタクリン酸により錐体細胞の細胞体では細胞内クロライドイオン濃度が上昇した。この変化は細胞外液にクロライドイオンの存在しないときには見られなかった。また、細胞内のATPを消費させ濃度を低下させると細胞内クロライドイオン濃度は上昇した。 3)Na/K/Cl共輸送系の阻害剤であるフロセミドは、錐体細胞内クロライドイオン濃度を低下させた。以上の結果から錐体細胞の細胞内クロライドイオン濃度は、クロライドイオンポンプによるCl^-汲み出しとNa/K/Cl共輸送系によるCl^-蓄積によって調節的に維持されていることが明らかになった。角膜内皮細胞 1)初代培養ウサギ角膜内皮細胞にMQAEを負荷し、細胞内クロライドイオン濃度の変化を観察した。 2)角膜内皮細胞内クロライドイオン濃度は、30.1±1.6mMであった。細胞内クロライドイオン濃度は、ノルアドレナリンにより一過性に低下し、ヨヒンビンでは持続性に低下し、フェニレフリンおよびイソプロテレノ-ルでは変化しなかった。ノルアドレナリンに対する反応は、α受容体遮断薬でフェントラミンにより消失した。以上の結果から、角膜内皮細胞はα_2受容体刺激によりクロライドイオンを排出することが明らかになった。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] M.Inoue et al.: "Ethacrynic acid-induced glutamate release from the mouse brain synaptosomes." Brain Research. 543. 160-162 (1991)
[Publications] T.Uriu et al.: "Two types of clathrine-coated vesicles in the rat brain:Analysis for cellular origin" J.Neurochemistry. 56. 1543-1556 (1991)
[Publications] M.Inoue et al.: "An ATP-driven Cl^- pump regulates Cl^- concentrations in hippocampal neurons." Neurosci.Lett.134. 75-78 (1991)
[Publications] Y.Kunugi et al.: "An ATP-driven Cl^- pump in the rat kidney." Japan.J.Pharmacol.57. 167-174 (1991)
[Publications] S.Ohnishi et al.: "Delayed shortening and shrinkage of cochlear outer hair cells." Am.J.Physiol.
[Publications] T.Hirose et al.: "Enflurane-induced relaese of excitatory amino acids from the mouse brain synapto-somes." Anesthesiology.
[Publications] C.Inagaki et al.: "Eletrogenic Chloride Transporters in Biological Membranes." Springer-Verlag, (1992)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

新規Cl^-感受性蛍光色素による細胞内Cl^-濃度の多点経時変化測定法の開発と応用

Principal Investigator

稲垣 千代子 関西医科大学, 医学部, 教授 (60025640)

Research Products

[Publications] M.Inoue et al.: "Ethacrynic acid-induced glutamate release from the mouse brain synaptosomes." Brain Research. 543. 160-162 (1991)

[Publications] T.Uriu et al.: "Two types of clathrine-coated vesicles in the rat brain:Analysis for cellular origin" J.Neurochemistry. 56. 1543-1556 (1991)

[Publications] M.Inoue et al.: "An ATP-driven Cl^- pump regulates Cl^- concentrations in hippocampal neurons." Neurosci.Lett.134. 75-78 (1991)

[Publications] Y.Kunugi et al.: "An ATP-driven Cl^- pump in the rat kidney." Japan.J.Pharmacol.57. 167-174 (1991)

[Publications] S.Ohnishi et al.: "Delayed shortening and shrinkage of cochlear outer hair cells." Am.J.Physiol.

[Publications] T.Hirose et al.: "Enflurane-induced relaese of excitatory amino acids from the mouse brain synapto-somes." Anesthesiology.

[Publications] C.Inagaki et al.: "Eletrogenic Chloride Transporters in Biological Membranes." Springer-Verlag, (1992)

稲垣千代子関西医科大学, 医学部, 教授 (60025640)