1991 Fiscal Year Annual Research Report
神経細胞の機能発現におけるイノシト-ル3リン酸受容体の関与とその分子機構
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02670107
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
新延 道夫 大阪大学, たんぱく質研究所, 助手 (80135748)
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| Keywords | IP_3受容体 / IP_3 / IP_4受容体 / IP_4 |
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| Research Abstract |
1)マウス小脳クミロソ-ム画分を用いたIP_3によるCa^<2+>遊離の系か既に確立しているが、この系を用いて、3種類のIP_3受容体に対するモノクロ-ン抗体がIP_3によるCa^<2+>遊離にどのような影響を及ぼすか調べたところ,C未論を認識する18A10がCa^<2+>遊離を阻害することが認められた。IP_3の結合部位がN第論測に存在するところから,IP_3によるアロステリックは構造変化がC未論測に生じCa^<2+>遊離を引き起こしたと考えられる。2)イノシト-ル1,3,4,5ーリン酸(以下IP_4と略す)がIP_3と同称に細胞内Ca^<2+>濃度を調節する重要なメッセンジャ-であることが近年知3+るようになっかだ,我々はマウス小脳に少くとも3種類のIP_4結合蛋白貭が存在することを明らかにした。さらに,一部のものについては高純度に精製されたものが得られ,諸性貭について調べたところ,IP_4に対する特異性が極めて高い受容体としての性貭を示すことが認められた。また,SDS電気泳動及びゲルロ過の結果より,2種の分子の複合体として存在することを明らかにした。3)精製されたIP_4受容体に対する抗体を用いて,マウス小脳における局在性を調べたところ,IP_3受容体と同株にプルキン工細胞に豊富に存在する蛋白貭であることを明らかにした。しかしながら,IP_3受容体が主として細胞体に局在するのに対してIP_4受容体は樹状突起に強い陽性反応を示した。この結果は両受容体が細胞内のそれぞれの場所で独立に機能しているとも考えられ興味深い。4)IP_4受容体に対する抗体を用いてマウス小脳cDNAライブラリ-よりIP_4受容体に対するcDNAクロ-ンをスクリ-ニングした結果,3種類のクロ-ンを検出した。現在,それぞれのクロ-ンについてノゲ-ンブロット解析及び塩基配列を調査しているところにある。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Yamamoto,H.: "Phosphorylation of P400 protein by cyclic AMPーdependent protein kinase and Ca^<2+>/calmodulinーdependent protein kinase 2." J.Neurochem.53. 917-923 (1989)
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[Publications] Maeda,N.: "Oevelopmental expression and intracellulan locntion of P400 protein characteristic of Puskinje cells in the mouse cerebellum." Develop.Biol.133. 67-76 (1989)
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[Publications] Maeda,N.: "A cevebellan Puskinze cell marker P400 protein is an inositol 1,4,5ーtn3phosphate(Ins P_3)receptor protein,Pusfication and characterization of Ins P_3 receptor complex." EMBO J.9. 61-67 (1990)
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[Publications] Otsu,H.: "Immunogold localization of Inositol 1,4,5ーtrisphosplate(IP_3)receptor in mouse cerebellen Puskinge using three monoclonal antibodies." Cell Structure and Function. 15. 163-173 (1990)
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[Publications] Maeda,N.: "Structural and functional cheractesization of Inositol 1,4,5ーtrisphosphate receptor chnnel from mouse cerebellum." J.Biol.Chem.266. 1109-1116 (1991)
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[Publications] Nakade,S.: "Involvement of the Cーterminas of the inositol 1,4,5ーtrisphophate receptor in Ca^<2+>release analysed using regionーspecific monoclonal antibodies." Biochem.J.277. 125-131 (1991)
