1991 Fiscal Year Annual Research Report

肝再生過程での核内蛋白リン酸化のカスケ-ドとそれに対するHBVーX遺伝子の影響

Research Project

Project/Area Number	02670294
Research Institution	The university of Tokyo, Faculty of medicine.
Principal Investigator	金子義保東京大学, 医学部・(病), 助手 (90124669)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	小池和彦東京大学, 医学部・(病), 助手 (90234658) 橋本佳明東京大学, 医学部・(病), 助手 (40172879)
Keywords	肝癌 / 肝再生 / 癸癌プロモ-タ- / C・キナ-ゼ / 肝炎ウィルス / cーfos / 細胞分化
Research Abstract	B型肝炎ウイルス遺伝子の組み込まれたPLC/PRF/5肝癌細胞においてシグナル伝達系がどのような状態にあるかを調べてみた。この肝癌細胞をCキナ-ゼ刺激物貭である癸癌プロモ-タ-テレオシジンとともに培養すると細胞増殖は抑制され、細胞は扁平となり拡大し,サイトケラチンの重合が著明となった。同時に細胞貭には空胞状構造が多数出現した。Cキナ-ゼ阻害物貭であるH_7,W_7,K252などを同時に加えて培養してもこれらのテレオシジン作用は阻止できななかった。けれども無細胞系でCキナ-ゼ活性を測定した場合に,テレオシジンによるCキナ-ゼ活性の上昇はH_7でほぼ完全に抑制された。従って細胞レベルでCキナ-ゼ阻害剤の効果が認められないのは,これらの阻害剤がすみなやかに分解されるか又は細胞内では反応できない立体構造や空間配置になっていることが示唆された。この細胞をホモゲナイズし,細胞貭をカラムで分離すると,Cキナ-ゼ活性は3つのピ-クに分かれた。そのうちのひとつは,通常のCキナ-ゼが溶出されない分画にあり,分子構造の異なるプロテインキナ-ゼが存在すると考えられた。このプロテインキナ-ゼ活性は細胞をテレオシジン存在下で長時間培養してもdown regulateされず,通常のCキナ-ゼと活性も異っていた。このdown regulationをうけないCキナ-ゼ様物貭がテレオシジンによる肝癌細胞の増殖抑制,形態変異に関与しているものと推測された。一方テレオシジンはcーfosの発現を促進させたが,この反応は30〜60分後にピ-クに達しその後漸減する。この一過性の反応はおそらくdown regulateされるCキナ-ゼを介して発現するものと考えられる。従ってこのPLC/PRF/5肝癌細胞でのPKC活性は,down regulateされるPKCとされないPKCが狙っており,後者が細胞増殖抑制や形態変異の誘導など長時間を要するテレオシジン作用と関連することが示唆された。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Kaneko,Y.,: "Alteration of differentiation state of human hepatocytes cultured with novobiocin and butyrate" cancer Research. 50. 3101-3105 (1990)
[Publications] kaneko,Y.,: "vacuole formation and cytokoratin rearrangement of hepatoma cells nduced by teleocidn are not associated with down regulation of protein Kinase C" Cancer Research. 51. 2677-2682 (1991)
[Publications] Tsukamoto,A,: "Novobicin modulates cytokeratin assembly and differentiation of human hepatoma cells nduced by butyrate and teleocidin." Cancer Lett.60. 51-57 (1991)
[Publications] Tsukamoto,A.: "Novobiocin and butyrate synnergistically enhanced cytokeration asscmbly and acetate uptake of human liver cells." Cell Biol Int.Report. 15. 983-984 (1991)
[Publications] Tsukamoto,A.,: "Increased asscmbly of cytoskeletal protems associated with the transformation of human liver cells into fibroblastーlike cells." Experientia. (1992)
[Publications] Koneko,Y.,: "Coordinate expression of cーfos,p53 and cytokerdtin genes during induction of hepatoma differentiation.mRNA levels measured by reverse transcription and PCR"
[Publications] 木谷健一,戸田剛太郎編,金子義保: "肝蔵" 南江堂, 294 (1990)
[Publications] 小高健編,金子義保: "研究部のあゆみ" 医科学研究所細胞遺伝, (1990)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

肝再生過程での核内蛋白リン酸化のカスケ-ドとそれに対するHBVーX遺伝子の影響

Principal Investigator

金子 義保 東京大学, 医学部・(病), 助手 (90124669)

Research Products

[Publications] Kaneko,Y.,: "Alteration of differentiation state of human hepatocytes cultured with novobiocin and butyrate" cancer Research. 50. 3101-3105 (1990)

[Publications] kaneko,Y.,: "vacuole formation and cytokoratin rearrangement of hepatoma cells nduced by teleocidn are not associated with down regulation of protein Kinase C" Cancer Research. 51. 2677-2682 (1991)

[Publications] Tsukamoto,A,: "Novobicin modulates cytokeratin assembly and differentiation of human hepatoma cells nduced by butyrate and teleocidin." Cancer Lett.60. 51-57 (1991)

[Publications] Tsukamoto,A.: "Novobiocin and butyrate synnergistically enhanced cytokeration asscmbly and acetate uptake of human liver cells." Cell Biol Int.Report. 15. 983-984 (1991)

[Publications] Tsukamoto,A.,: "Increased asscmbly of cytoskeletal protems associated with the transformation of human liver cells into fibroblastーlike cells." Experientia. (1992)

[Publications] Koneko,Y.,: "Coordinate expression of cーfos,p53 and cytokerdtin genes during induction of hepatoma differentiation.mRNA levels measured by reverse transcription and PCR"

[Publications] 木谷 健一,戸田 剛太郎 編,金子 義保: "肝蔵" 南江堂, 294 (1990)

[Publications] 小高 健 編,金子 義保: "研究部のあゆみ" 医科学研究所細胞遺伝, (1990)

金子義保東京大学, 医学部・(病), 助手 (90124669)

[Publications] 木谷健一,戸田剛太郎編,金子義保: "肝蔵" 南江堂, 294 (1990)

[Publications] 小高健編,金子義保: "研究部のあゆみ" 医科学研究所細胞遺伝, (1990)