1991 Fiscal Year Annual Research Report
スキルス胃癌における浸潤と間質誘導の機序に関する分子生物学的解析
| Project/Area Number |
02670311
|
|---|
| Research Institution | Sapporo Medical College |
|---|
Principal Investigator |
茂木 良弘 札幌医科大学, 医学部, 講師 (30190953)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
新津 洋司郎 札幌医科大学, 医学部, 教授 (10045502)
|
|---|
| Keywords | スキルス胃癌 / 間質増生 / びまん性浸潤 / TGFーβ / TGFーβ activator / E型カドヘリン / E型カドヘリン発見ベクタ- |
|---|
| Research Abstract |
スキルス胃癌の間質増生におけるTGFーβの意義を解明する目的で、スキルス胃癌細胞株から活性型TGFーβの分泌を明らかにし、その活性化の機序を検討した。スキルス胃癌細胞株KATO IIIのconditioned medium(CM)中には強いTGFーβ活性が認められたが、酸処理をしてもTGFーβ活性に変化がみられず大部分が活性型で存在した。このKATO IIIのcell lysate中のTGFーβ活性は未処理では検出されず、酸処理により強いTGFーβ活性が検出された。また、KATO III由来のTGFーβの分子量はTGFーβ前駆体に相当する約50kDaであった。従って、KATO III由来のTGFーβは細胞内では不活性型で存在し、細胞外に放出された後に活性化されると推察された。このKATO IIIのCMをHPLCで分析したところ、分子量約6ー7万の位置に不活性型TGFーβを活性型に変換する因子が存在した。この因子は、熱、酸、trypsin、各種serine protease inhibitorで失活したが、α_2 plasmin inhibitorや他のprotease inhibitorには安定であった。以上より、スキルス胃癌由来細胞KATO IIIは不活性型TGFーβとともにそれを活性化するplasminとは異なるある種のserine proteaseを産生、放出し、細胞外で活性型TGFーβに変換することが示唆された。一方、スキルス胃癌におけるカドヘリンの発現と浸潤能との関連を明らかにする目的で、E型カドヘリン発現ベクタ-(pBATEM_2)をKATO IIIに遺伝子導入し、その接着性、浸潤性に与える影響を検討した。KATO III細胞はWestern blotでカドヘリンの発現を認めなかったが、pBATEM_2導入KATO IIIは124KDのE型カドヘリンの発現が確認され、しかも細胞どうしの接着性が亢進していた。さらに、in vitroでのdouble chamberを用いたinvasion assayにおいてその浸潤性は低下していた。従って、スキルス胃癌ではカドヘリン発現の低下が細胞間接着機構を失なわせ、癌細胞の細胞塊からの遊離をうながし浸潤、転移を起こしやすい状態にすると考えられた。
|
Research Products
(7 results)
-
[Publications] Terui,T.,et al: "The production of transforming growth factorーβ in acate megakaryoblastic leukemia and its possible implications in myelofibrosis" Blood. 75. 1540-1548 (1990)
-
[Publications] Kohda,K.,et al: "Diagnostic significance of mesurement of serum type I procollagen termianl peptides in patients with scirrhous carciona of the stomach" Gut. 32. 624-629 (1991)
-
[Publications] Mogi,Y.,et al: "Platelet aggregation induced by adenosine diphosphate released from cloned murine fibrosarscoma cells is positively correlated with the experimental metastic potential of the cells." Jpn.J.Cancer Res. 82. 192-198 (1991)
-
[Publications] Mahara,K.,et al: "Implication of transforming growth factorーβ for increased collagen deposition in scirrhous cancer."
-
[Publications] Horimoto,M.,et al: "Identification and partial characterization of a transforming growth factorーβ activator derived from a scirrhous gastric cancer cell line"
-
[Publications] Matsuura,K.,et al: "Altered expression of Eーcadherin in gastric cancer tissues and carcinomatous fluid."
-
[Publications] Mogi,Y.,Terui,T.,Mahara,K.,Fujisaki,Y.,Horimoto,M.,Takimoto,R.,Kohgo,Y.,Watanabe,N.and Niitsu,Y.: "The role of Megakaryoblasts derived transforming growth factorーβ in myelofiblosis:International Symposium on Myelodysplastic Syndrome and Cytokine" Miyazaki,T.editor Elsevier Science Pub,B.V., 8 (1991)
