1991 Fiscal Year Annual Research Report
高血圧における神経終末でのNE再摂取に関する研究ー体液性因子による影響および神経興奮時の変化についてー
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02670406
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| Research Institution | Wakayama Medical College |
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Principal Investigator |
羽野 卓三 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (90156381)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
西尾 一郎 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (40089165)
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| Keywords | Na,KーATPase阻害物質 / 部分腎摘食塩ラット / ノルエピネフリン / 再摂取 / シナプトゾ-ム / digαin / ouabain |
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| Research Abstract |
本年度は、腎摘食塩負荷高血圧ラットの尿より内因性Na,KーATPase阻害物質を部分精製し、交感神経終末のモデルとしてラット視床下部synaptosomeへのnorepinephrine再摂取への影響をみた。
7週齢Wistarラットの腎を60〜70%摘除後、1%食塩水を1週間飲水させ、腎摘食塩負荷高血圧ラットを作成した。1週間後より3日間代謝ケ-ジ内で飼育し、尿を採取した。尿を吸着カラムで処理後ゲル濾過で得られたNa,KーATPase阻害度の高い分画を、ODSカラムを用いた逆相HPLCにて分離すると、保持時間31分、acetonitril 42%でNa,KーATPase阻害度、digoxin様免疫活性の高い分画が得られた。さらに、サイズ排除HPLCで分離すると、保持時間14分に溶出される物質が得られた。分離された物質は、濃度依存性にNa,KーATPaseを抑制した。Digoxin様免疫活性に関しては、本抗体はdigoxinとは濃度依存的に結合を示したが、quabain,digoxinと僅かに結合するのみで、DHEA、γーoleovlーLPCとはほとんど結合を示さなかった。逆相HPLCでの保持時間すなわち極性を分離した物質と既報の脂質、ステロイド、強心配糖体と比較した。本物質はdigoxinに近い中等度の極性を持っていた。さらに、サイズ排除HPLCで保持時間より、本物質の分子量は約400であると推定された。
Norepinephrine再摂取は、ラット視床下部synaptosomeへの ^3HーNE摂取により測定し、精製した内因性Na,KーATPase阻害物質を加えNE摂取に及ぼす影響をみた。その結果、分離した物質は、濃度依存的にsynaptosomeへのNB摂取を抑制した。
以上より、腎摘食塩高血圧ラット尿より部分精製した内因性Na,KーATPase阻害物質は、dogoxinに近い物質を持ち、交感神経終末でのnorepinephrine再摂取阻害作用を認めた。
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[Publications] 木村 桂三: "内因性ジギタリス様物質の交感神経終末での作用に関する検討" Therapeutic Research. 12. 330-334 (1991)
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[Publications] 羽野 卓三: "α_<1B>受容体を介したvasopressinの血管反応増強作用" 心臓. 23. 59-61 (1991)
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[Publications] M.Shiotani: "Altered renin release from isolated superfused rat glomeruli in DOCAーsalt hypertensive rats" Clin Exp Hypertens. A13(6 & 7). 1223-1232 (1991)
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[Publications] T.Ueyama: "Release of nerve growth factor from cultured aortic smoothーmuscle cells" Blood Vessels. 28. 532-536 (1991)
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[Publications] T.Ueyama: "New role of nerve growth factor ーan inhibitory neuromodulator of adrenergic transmissionー" Brain Reseach. 559. 293-296 (1991)
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[Publications] T.Hano: "Contribution to Nephrology:Calciumーregulating hormones.I.Role in disease and Aging." Karger,Basel, 6 (1991)
