1991 Fiscal Year Annual Research Report
移植腎の拒絶反応に動員されるT細胞抗原受容体の解析
Project/Area Number |
02670718
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Research Institution | Kitasato University |
Principal Investigator |
小幡 文弥 北里大学, 医学部, 講師 (60129236)
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Keywords | T細胞抗原受容体 / HLAーDR / MLR / 同種免疫応答 |
Research Abstract |
移植腎に対する拒絶反応には、ドナ-のHLAーDR抗原が重要であることが知られている。本年度では、昨年度にひき続き、試験管内同種免疫反応である混合リンパ球培養反応(MLR)において、DR抗原認識に動員される下細胞抗原受容体(TCR)の解析を進めるとともに、腎からのT細胞分離法の確立を行った。MLRの応答細胞、刺激細胞としてDRB1*0403/*1201およびDRB1*/0406ホモ接合体を選び、DR分子上の1個のアミノ酸残基( ^<37>Y)のみを認識するT細胞集団を誘導した。昨年度までに確立したAnchorーLigation PCR法にてTCRB鎖cDNAの塩基配列を決定した。解析した27個のcDNAMLRで得られた結果が、in vivo同種免疫反応である移植腎拒絶反応においてもあてはまるか否かを検討するため、以下の予備実験を行った。剖検腎からバイオプシ-用針で少量の腎組織を採取し、ハサミ細断の後室温で1時間コラゲナ-ゼ処理を行った。リンパ球の損傷、腎細胞との分離を調べるため、人為的に末梢血リンパ球を混入させた試料についても検討を行った。その結果、0.5mg/mlのコラゲナ-ゼ処理がリンパ球に損傷を与えず腎組織を効果的に分解すること、又、腎細胞とリンパ球は、比重遠心法によりほぼ完全に分離できることがわかった。
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[Publications] Obata F,Ito K,Kaneko T,Ynag Y,Onda K,Ito I,Yabe N,Watanabe K & Kashiwagi N: "HLAーDR gene frequencies in the Japanese population obtained by oligonucleotide genotyping." Tissue Antigens. 38. 124-132 (1991)
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[Publications] Watanabe K,Yuge K,Sato K,Sonoda K,Masaki K,Maruyama S,Ohkubo M,Obata F,Otani F,Kaneko T,et al.: "Donor bone marrow cell facilitates induction of tolerance to kidney allografts in dogs treated with fractionated lymphoid irradiation and FK506." Transplantation Proceedings. 23. 568-572 (1991)
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[Publications] Onda K,Obata F,Tsunoda M,Kato H,Ito I,Yang Yーg,& Kashiwagi N.: "Sequence analysis of Tーcell receptors used in allogeneic mixed lymphocyte reaction." Kitasato Archives of Experimental Medicine.
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[Publications] Obata F and Kashiwagi N: "Oxford University Press"
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[Publications] Obata F: "Oxford University Press" Tーcell recognition of HLAーclass II molecules.In HLA 1991 vol I(eds.Tsuji K,Sasazuki T,Aizawa M).
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[Publications] Obata F: "Oxford University Press" Tーcell recognition of HLAーclass II molecules.In HLA 1991 vol I(eds.Tsuji K,Sasazuki T,Aizawa M). "Joint report of the Tーcell component:Sequence analysis of the Tーcell receptor utilized for recognition of allogeneic HLAーclass II molecules.In HLA 1991 Vol I(eds.Tsuji K,Sasazuki T,Aizawa M)"