1990 Fiscal Year Annual Research Report
培養顆粒膜細胞における各種成長因子のホルモン分泌並びに細胞内Caに与える影響
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02670735
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
鎌田 周作 東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (80169606)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
久保田 俊郎 東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (50126223)
麻生 武志 東京医科歯科大学, 医学部, 教授 (60093176)
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| Keywords | IGFーI / IGFーII / ETー1 / 顆粒膜細胞 / 細胞内カルシウム濃度 / イノシト-ルフォスフェイト / cーAMP / ホルモン分泌 |
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| Research Abstract |
Insulinーlike Growth Factor(IGF)にはIGFーIとIGFーIIの2種類の存在が知られている。女性における生殖内分泌の中心である卵巣、とりわけ顆粒膜細胞に対するIGFーIの作用は数多くの報告がみられるが、IGFーIIに関してはほとんど報告をみない。そこで我々はまずhuman IGFーII recambinant(Eli Lilly社)とIGFーII monoclonal抗体(天野製薬)を用いてRIA系を確立した。そして11名の体外受精施行婦人より採卵時に得られた卵胞液21検体中のIGFーI,IGFーIIの濃度を特異的RIA法を用いて検討した。各々の濃度はIGFーI:75.9±6.7,IGFーII:663.8±57.3ng/nl(mean I SEM)であり,IGFーII値はIGFーI値の約8倍の高値を示した。卵胞液中のIGFーIとIGFーIIには有意な正の相関(r=0.944,p<0.001)がみられ、IGFーI,IIともEstradiol(E_2)とPrtgesterone(P)と有意な正の相関を示した。invivoにおいてIGFが顆粒膜細胞の機能に深く関与している可能性が示唆されたため、ブタの培養顆粒膜細胞を用いて,invitroの実験系におけるIGFのブタ顆粒膜細胞のsteroidogenesisに対する影響を検討した。neeclle agpiration methodにより顆粒膜細胞を採取し、DMEM(無血清)にて3×10^5viableccll/ivellとなるよう単層培養した。この培養系を用いて、IGFーI1000(1),100(2),10(3)ng/nl,IGFーII100(4),10(5),1(6)ng/mlの各濃度添加24時間後のmedium中のP,E_2濃度をcontrol群(100%)と比較した。medium中のP濃度は(1)318±38%(P<0.051)(2)316±35%(P<0.501)(3)213±27%(P<0.01)(4)226±21%(P<0.01)(5)160±27%(11.5)(6)78±6%(11.5)であり,E_2濃度は(1)184±25%(P<0.001)(2)270±29%(P<0.001)(3)203±19%(P<0.001)(4)211±7%(P<0.001)(5)114±4%(P<0.05)(6)107±4%(11.5)であったまたmedium中のcyclicAMP濃度は,(1)185±6%(P<0.01)(2)182±8%(P<0.01)(3)196±3%(P<0.01)(4)138±5%(P<0.05)(5)116±8%(11.5)(6)110±6%(11.5)でありIGFーI,IIとも,cyclic AMP依存性に顆粒膜細胞のP,E_2産生を促進することが明らかになった。なお,IGFーI,IIはともにブタ顆粒膜細胞の細胞内Ca^<2+>濃度に変化を与えなかった。
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[Publications] Shusaku Kamada: "Direct effects of bromocriptine on the steroidogen capability of porcine grannlosa cells" Fertility and Sterility.
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[Publications] Shusaku Kamada: "Endothelinー1 stimulates Ca^<2+> mobilization and inositol phosphnte generation in porcine cultured granulosacolls" FEBS Lett.
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[Publications] 久保田 俊郎: "羊水中におけるprolactinとInsulinーlike growth factorーIとの関連性に関する研究" 日本受精着床学会雑誌.
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[Publications] 久保田 俊郎: "Insulinーlike growth factorーI及びIGFーIIのヒト脱落腰・羊水系prolaotin分泌に及ぼす影響" 日本産科婦人科学会雑誌.
