培養顆粒膜細胞における各種成長因子のホルモン分泌並びに細胞内Caに与える影響

1991 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 02670735
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 鎌田 周作 東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (80169606)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 久保田 俊郎 東京医科歯科大学, 医学部, 講師 (50126223) ; 麻生 武志 東京医科歯科大学, 医学部, 教授 (60093176)
• Keywords: IGFーII / IGFーI / 顆粒膜細胞 / steroidogenesis / 細胞増殖 / cーAMP / 細胞内Ca^<2+>濃度 / autocrine調節

Research Abstract

Insulirーlike growth factorーII(IGFーII)の顆粒膜細胞に対する影響をヒト(HGC)並びにブタ(PGC)顆粒膜細胞を用いて検討した。HGCの培養法は、Leeの報告による方法に準じて、PGCの培養法はChanningの報告による方法に準じて施行、まず10%FCSがDMENをmedinmとして48時間のpreincabation後無血清DMENにて各々の添加実験を行った。medium中progesterone(P),estradiol(E_2) cAMPの測定実験では、5×10^5 riables/cell/well,細胞数と〔 ^3H〕thymicline取り込み実験においては、1×10^5 riable eolls/wellの細胞数で実験した。使用したIGFーIIの濃度は1〜100ng/mlであった。〔結果〕(1)IGFーIIはHGCにおいて用量依存性にそのP,E_2分泌を促進した。(2)IGFーIIは1〜100ng/mlの濃度において、中小卵胞由来のPGC(SMーPGC)のbasal progesierone分泌を用量依存性に促進した。(3)この作用はFSH並びにhCGでSlimnlateされたSMーPGLにおいても同様に見られた。(4)この作用は大卵胞由来のPGC(LーPGC)においては、100ng/mlのIGFーII濃度においてのみ見られた。(5)IGFーIIは1〜100ng/mlの濃度においてSMーPGCのbasal estracliol分泌を用量依存性に促進した。(6)この作用は、FSH並びにhCGでstimulateされたSMーPGCにおいても同様に見られた。(7)この作用はLーPGCにおいても全く同様に見られた。(8)IGFーIIはPGCの〔 ^3H〕thymidine取り込みを用量依存性に増加した。(9)IGFーIIはPGCの細胞数を用量依存性に増加した。(10)これらのIGFーIIの作用は、IGFーIと全く同様のものであった。(11)IGFーIIはPGCにおけるcーAMP産生を用量依存性に促進した。(12)しかしIGFーIIはPGCの細胞内Ca^<2+>濃度には全く影響を及ぼさなかった。〔結論〕以上の結果より、IGFーIIはAーkinase系を介して顆粒膜細胞のsteroidogenesisや細胞増殖に対して促進的に働くことが示唆された。IGFーIIは、IGFーIと同様に、顆粒膜細胞の増殖、分化の局所的なstimnlatorであることが確認された。

Research Products

• [Publications] 久保田 俊郎: "Insulinーlike growth factorーI及びIGFーIIのヒト脱落膜・羊水系prolactin分泌に及ぼす影響。" 日本産科婦人科学会雑誌. 43. 1515-1520 (1991)
• [Publications] 久保田 俊郎: "ヒト卵胞液中のInsulinーlike growth factorーII及びIGFーIレベルの検討" 日本受精着床学会雑誌. 9. 63-65 (1992)
• [Publications] Toshiro Kubota: "Role of argiotensin on paracrine prolactin release in the pituitary glard and its possible effects on orarian function" Hormone Research. 35. 13-20 (1991)
• [Publications] Shnsaku Kamada: "Direct effects of bromocriptine on the steroidogenic capability of porcine granulosa cells" Acta Endocrinologica. 126. (1992)
• [Publications] Shusaku Kamada: "Direct effect of endothelinー1 on the granulosa cells of the porcine ovary" Journal of Endocrinology. (1992)
• [Publications] Shusaku Kamada: "Effects of insulinーlike growth factorーII on proli Peration and differeritiation of ovarian grannlosa cells" Biology of Repraduction.