1991 Fiscal Year Annual Research Report
腫瘍壊死因子(TNF)による情報伝達と細胞応答(増殖と傷害)機構の分子論的解析
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02671023
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| Research Institution | UNIVERSITY OF SHIZUOKA |
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Principal Investigator |
奥 直人 静岡県立大学, 薬学部, 助教授 (10167322)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
伊藤 文昭 摂南大学, 薬学部, 教授 (80111764)
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| Keywords | 腫瘍壊死因子 / TNF / 細胞傷害 / 細胞増殖 / プロスタグランジン / Gタンパク質 / 情報伝達機構 |
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| Research Abstract |
腫瘍壊死因子(TNF)は培養腫瘍細胞に対する傷害活性と、正常繊維芽細胞に対する増殖促進活性を併せ持つ。我々は、TNFがヒト正常繊維芽細胞FSー4の増殖を促進する際にも、ネガティブ調節機構として増殖抑制的に働くプロスタグランジン(PG)を生成していること、PGを過剰生産させることにより、正常細胞もTNFによって傷害を受けることを見いだした。そこでTNF刺激により産生されるPGを検討した結果、FSー4における主要なPGがPGE_2であり、その産生がTNF刺激によって増大すること、インドメタシンで促進されたFSー4の増殖は外から加えたPGE_2により抑制されることを見いだした。先にTNF刺激によりPG産生が起こる過程で、ホスホリパ-ゼA_2が活性化されることを見いだしている。そこでTNF刺激の初期段階を検討する目的で、ヒト胎盤よりのTNF受容体の精製と性状解析を試みた。TNFアフィニティ-クロマトグラフィ-で精製して得られた受容体は、300kDaの分子集合体であり、Gタンパク質を含むことが明らかとなった。すなわちTNFの情報伝達に関しては、Gタンパク質を介したホスホリパ-ゼの活性化、アラキドン酸の遊離、PGの生合成に至る過程が示唆された。次にTNF感受性細胞と耐性細胞を用いたTNF細胞傷害活性におけるPGの関与について検討した。TNFによる細胞傷害に感受性のマウスL929細胞では主にPGE_2が産生されており、TNFにより産生が高まることが明らかとなった。またL929細胞より得られた全てのTNF耐性株で、TNFによるアラキドン酸の遊離、およびPGE_2の産生増加が観察されなかった。以上の事実はPG産生と細胞傷害活性との関連を示唆している。本研究は、細胞情報伝達、増殖、癌化機構などの解明にも役立つものと思われる。
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[Publications] Takamitsu Hori: "Growth Inhibition of Human Fibroblasts by Epidermal Growth Factor in the Presence of Arachidonic Acid" Biochem.Biophys.Res.Commun.169. 959-965 (1990)
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[Publications] Takamitsu Hori: "Prostagladins Antagonize Fibroblast Proliferation Stimulated by Tumor Necrosis Factor" Biochem.Biophys.Res.Commun.174. 758-766 (1991)
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[Publications] Makio Hayakawa: "Solubilization of Human Placental Tumor Necrosis Factor Receptors as a Complex with a Guanine Nucleotidebinding Protein" Arch.Biochem.Biophys.286. 323-329 (1991)
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[Publications] Makio Hayakawa: "Involvement of Prostaglandinーproducing Pathway in the Cytotoxic Action of Tumor Necrosis Factor" Cell Struct.Funct.16. 333-340 (1991)
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[Publications] Masafumi Tsujimoto and Naoto Oku: "“Regulations of TNF Receptors"in “Tumor Necrosis Factors:Structure,Function,and Mechanisms of Action."(B.B.Aggarwal and J.T.Vilcek,eds.)pp.149ー160" Marcel Dekker,Inc., 12 (1991)
