1991 Fiscal Year Annual Research Report
サイトカインによる細胞の増殖調節機構ーPDGFとTGFβの作用ー
Project/Area Number |
02671029
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Research Institution | Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology |
Principal Investigator |
加治 和彦 (財)東京都老人総合研究所, 老化科学技術研究系・アイソトープ部門, 主査研究員 (40073019)
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Keywords | 血管内皮細胞 / 線維芽細胞 / 無血清培養法 / PDGF / TGFβ / TGFβレセプタ- |
Research Abstract |
1TGFβsのヒト血管内皮細胞への作用とレセプタ-解析 ヒト血管内皮細胞の増殖に及ぼす作用は,細胞の種類,培養条件(細胞外基質の添加の有無),さらにTGFβのアイソフォ-ム(β_1およびβ_2)によっても異なった。それらの作用を細胞のレセプタ-を解析する方向から検討した。TGFβ_1を ^<125>I標識し,アフィニディラベル法を用いた。さい帯静脈ならびに肺静脈由来内皮細胞は,約80kDaと180とkDaのアイソフォ-ム特異的な結合性を示すTGFβ結合成分を発現している。180kDa成分はタイプIIIレセプタ-とは関連のない親規のTGFβレセプタ-(または結合蛋白)であろう。大網微小血管由来の内皮細胞では180kDaの成分は検出されず,双方のアソフォ-ムを結合する約300,80,および60kDaのタイプIII,II及びIレセプタ-に相当するTGFβ結合成分の発現を認めた。180kDaTGFβレセプタ-/結合蛋白の性状と情報伝達系における役割を検討中である。 2ヒト線維芽細胞に及ぼすサイトカイン ヒト線維芽細胞,TIGー7,WIー38細胞の無血清培養法を確立した。この培養系において,PDGF,FGF,EGF等は増殖促進因子として,TGFβが阻害因子として作用していることが明らかになった。TGFβを加えると,細胞はG_1期に停止した。また,アクチン束の顕著な発達がみられた。これらのTGFβの作用は可逆的であった。 3ヒトPDGFアイソフォ-ムの同定 ヒトPDGFのA鎖,B鎖を特異的に認識する抗体の作成に成功した。これを用いて,SKーMGー1細胞(ヒトアストロサイト-マ)に新規の長鎖型PDGF(AA)の存在を確認した。
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[Publications] Kaji,Kazuhiko: "Purification and characterization of a factor produced by Paramecium tetraurelia" In Vitro. 27. 48 (1991)
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[Publications] Kaji,Kazuhiko: "Growth inhibition and cell shape alteration of human diploid fibrorlasts due to troanforming growth factor-β1 in serum free media" Zoological Science. 8. 491-497 (1991)
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[Publications] Yamamoto,Kiyotaka: "A new human male diploid cell strein,TIG-7:Its age-related changes and comparison with a matched female TIG-I cell strain" Exp.Gerantal. 26. 525-540 (1991)
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[Publications] Hirai,Reiko: "Transforming growth factor β1-specific binding proteins on humen vascular endothelial cells" Exp.cell Res.
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[Publications] 加治 和彦: "無血清培養系ー基本的な考え方ー" Human Cell. 4. 87-92 (1991)
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[Publications] 加治 和彦: "機能細胞の培養とその応用II 1)内皮細胞" 代謝. 29. 79-90 (1992)
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[Publications] 佐藤 昭夫: "血管の機能と障害ー老化を含めてー" 藤田企画, 377 (1991)
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[Publications] 加治 和彦: "細胞とバイオサイエンス I.II" 朝倉書店, 391 (1991)