1991 Fiscal Year Annual Research Report

DNA修復欠損遺伝病細胞における突然変異の解析

Research Project

Project/Area Number	02671046
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	八木孝司京都大学, 医学部, 助教授 (80182301)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	武部啓京都大学, 医学部, 教授 (10028318) 巽純子京都大学, 医学部, 助手 (80128222)
Keywords	DNA修復 / 突然変異 / 色素性乾皮症 / 小脳性運動失調症 / 高発がん性遺伝病 / 紫外線 / ガンマ線
Research Abstract	ヒト正常細胞および色素性乾皮症(XP)A,C,F群細胞で生ずる自然突然変異の種類をシャトルベクタ-pZ189を用いて調べた結果、どの細胞においても50%以上は欠失変異であった。残りは塩基対置換変異であり、その中でトランスバ-ジョンの割合が紫外線(UV)誘発変異と比べて、有意に高かった。ヒトとはDNA修復能が異なるマウス細胞におけるUV誘発変異の種類をpYZ289を用いて調べ、ヒト細胞のと比較した。塩基対置換変異のうち91%はG:C→A:Tトランジションであり、これはヒトA群XP細胞におけるUV誘発変異の割合に近く、ヒト正常細胞のより有意に高かった。ヒト正常細胞および小脳性運動失調症(AT)患者細胞におけるガンマ線誘発突然変異の頻度をpZ189を用いて調べたが、20グレイ照射までは両者に差は見られなかった。 DNA二本鎖切断の修復をヒト正常細胞とAT細胞で比較するため、制限酵素AvaIで1カ所切断されるシャトルベクタ-pZ189Avaを作成し、細胞内で起こるDNA鎖再結合の割合と正確さを調べた。両者において、切断されたpZ189Avaが再結合される割合に差がなかったが、再結合の正確さは正常細胞の方が有意に高かった。誤った再結合部の塩基配列変化を調べると、AT細胞においては切断末端部付近の数〜数十塩基を欠失するものが大部分であったが、正常細胞ではそれらは少なく、大きな挿入を有するものの割合が高かった。AT細胞のガンマ線高感受性の機構の1つとして、DNA二本鎖切断の再結合修復の正確度が低いことが原因である可能性を示す。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Chikako Nishigori: "Altered O^6ーalkylguanineーDNA alkyltransferase activity in cell Strains originating from mouse skin tumors induced by UV irradiation." Cancer Research. 51. 2425-2429 (1991)
[Publications] Takashi Yagi: "Analysis of point mutations in an ultravioletーirradiated shuttle vector plasmid propagated in cells from Japanese xeroderma pigmentosum patients in complementation groups A and F." Cancer Research. 51. 3177-3182 (1991)
[Publications] Mayumi Sato: "Protective effects of sodium selenite on killing and mutation by NーmethylーN'ーnitroーNーnitrosoguanidine in E.coli." Mutation Research. 250. 73-77 (1991)
[Publications] Suming Wang: "Reduced DNA repair in progeria cells and effects of γーray irradiation on UVーinduced unscheduled DNA synthesis in normal and progeria cells." Mutation Research. 256. 59-66 (1991)
[Publications] Shinーichi Moriwaki: "Analysis of NーmetylーNーnitrosoureaーinduced mutations in a shuttle vector plasmid propagated in mouse O^6ーmethylguanineーDNA methyltransferaseーdeficient cells in comparison with proficient cells." Cancer Research. 51. 6219-6223 (1991)
[Publications] Takashi Yagi: "UVーinduced base substitution mutations in a shuttle vector plasmid propagated in group C xeroderma pigmentosum cells." Mutation Research. (1992)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

DNA修復欠損遺伝病細胞における突然変異の解析

Principal Investigator

八木 孝司 京都大学, 医学部, 助教授 (80182301)

Research Products

[Publications] Chikako Nishigori: "Altered O^6ーalkylguanineーDNA alkyltransferase activity in cell Strains originating from mouse skin tumors induced by UV irradiation." Cancer Research. 51. 2425-2429 (1991)

[Publications] Takashi Yagi: "Analysis of point mutations in an ultravioletーirradiated shuttle vector plasmid propagated in cells from Japanese xeroderma pigmentosum patients in complementation groups A and F." Cancer Research. 51. 3177-3182 (1991)

[Publications] Mayumi Sato: "Protective effects of sodium selenite on killing and mutation by NーmethylーN'ーnitroーNーnitrosoguanidine in E.coli." Mutation Research. 250. 73-77 (1991)

[Publications] Suming Wang: "Reduced DNA repair in progeria cells and effects of γーray irradiation on UVーinduced unscheduled DNA synthesis in normal and progeria cells." Mutation Research. 256. 59-66 (1991)

[Publications] Shinーichi Moriwaki: "Analysis of NーmetylーNーnitrosoureaーinduced mutations in a shuttle vector plasmid propagated in mouse O^6ーmethylguanineーDNA methyltransferaseーdeficient cells in comparison with proficient cells." Cancer Research. 51. 6219-6223 (1991)

[Publications] Takashi Yagi: "UVーinduced base substitution mutations in a shuttle vector plasmid propagated in group C xeroderma pigmentosum cells." Mutation Research. (1992)

八木孝司京都大学, 医学部, 助教授 (80182301)