1991 Fiscal Year Annual Research Report

癌関連糖鎖抗原の性質,発現機構および生物学的意義について

Research Project

Project/Area Number	02680144
Research Institution	Department of Biotechnology, Faculty of Engineering, Kyoto Sangyo University
Principal Investigator	中田博京都産業大学, 工学部・生物工学, 助教授 (90113141)
Keywords	Tn抗原 / ロイコシアリン / 癌関連糖鎖抗原
Research Abstract	T細胞系の培養細胞株JurkatのロイコシアリンにTn抗原が発現されていることを見い出し,その性質を検討した。Jurkat細胞に存在するロイコシアリンの糖鎖はGalNAc残基のみからなるOーグリカンが80%以上を占め、T_n抗原が発現されていることが予想された。先ず、抗Tn抗体であるMLS128をJurkat細胞に加えると細胞が凝集することを確認した。さらに、 ^3Hーグルコサミンで標識したJurkat細胞のlgsateよりMLS128による免疫沈降物を調製し、SDSーPAGE後、フルオログラフィ-で同定した。約120kダルトンのほぼ単一なバンドが観察された。ロイコシアリンは、当初福田らによって、WGAに結合する主要糖タンパク質として単離されているので、WGA結合タンパク質と比較したところ、その分子サイズは全く一致した。ロイコシアリンは他の血球系細胞にも発現されているが、K562細胞の場合もその糖鎖としてGalNAc残基のみからなるOーグリカンを10%程度持っていることが知られている。K562細胞についても同様の実験を試みたが、K562細胞にはTn抗原は発現されていなかった。この結果は、Tn抗原の構造がGalNAcーThr(Ser)のような単純な構造ではないことを示している。次に、Jurkat細胞を ^<35>Sーメチオニンで15分間パルスラベルし、種々の時間チェイスし、各細胞のlysateより免疫沈降物を調製した。さらにその上清にGalNAcーSer(Thr)と反応するサルビアレクチンを加え、反応物を得た。それぞれをSDSーPAGEし、フルオログラフィ-としたところ、サルビアレクチンと反応するロイコシアリンはチェイス10分程度で固定可能であったのに対し、MLS128の免疫沈降物はチェイス30分以後に観察された。この結果も、Tn抗原がGalNAcーSer(Thr)の単純な構造ではないことを示している。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Numata Yoshito: "A monoclonal antibody directed to Tn antigen" Biochem.Biophys.Res.Commun.170. 981-985 (1990)
[Publications] Kitagawa Hiroshi: "Occurrence of tetra-and pentasaccharides with the sialyl-Le^a structure in human milk" J.Biol.Chem.265. 4859-4862 (1990)
[Publications] Kitagawa Hiroshi: "Novol oligasaccharides with the sialyl-Le^a structure in human milk" Biochemistry. 30. 2869-2876 (1991)
[Publications] Nakada Hiroshi: "Expression of the Tn antigen on T-lymphoid cell line Jurkat" Biochem.Biophys.Res.Commun.179. 762-767 (1991)
[Publications] Kitagawa Hiroshi: "Characterization of mucin-type oligosacc harides with the sialyl Le^a structure from human colorectal adenocarcinoma cells" Biochem.Biophys.Res.Commun.178. 1429-1436 (1991)
[Publications] Nakada Hiroshi: "Elucidation of an essential strcture recognized by an anti-GalNAcα-Ser(Thr)monoclonal antibody (HLS128)" J.Biol.Chem.266. 12402-12405 (1991)
[Publications] 中田博: "新生化学実験講座3糖タンパク質(下)" 東京化学同人, (1989)
[Publications] 中田博: "蛋白核酸酵系Tn抗原" 共立出版,

1991 Fiscal Year Annual Research Report

癌関連糖鎖抗原の性質,発現機構および生物学的意義について

Principal Investigator

中田 博 京都産業大学, 工学部・生物工学, 助教授 (90113141)

Research Products

[Publications] Numata Yoshito: "A monoclonal antibody directed to Tn antigen" Biochem.Biophys.Res.Commun.170. 981-985 (1990)

[Publications] Kitagawa Hiroshi: "Occurrence of tetra-and pentasaccharides with the sialyl-Le^a structure in human milk" J.Biol.Chem.265. 4859-4862 (1990)

[Publications] Kitagawa Hiroshi: "Novol oligasaccharides with the sialyl-Le^a structure in human milk" Biochemistry. 30. 2869-2876 (1991)

[Publications] Nakada Hiroshi: "Expression of the Tn antigen on T-lymphoid cell line Jurkat" Biochem.Biophys.Res.Commun.179. 762-767 (1991)

[Publications] Kitagawa Hiroshi: "Characterization of mucin-type oligosacc harides with the sialyl Le^a structure from human colorectal adenocarcinoma cells" Biochem.Biophys.Res.Commun.178. 1429-1436 (1991)

[Publications] Nakada Hiroshi: "Elucidation of an essential strcture recognized by an anti-GalNAcα-Ser(Thr)monoclonal antibody (HLS128)" J.Biol.Chem.266. 12402-12405 (1991)

[Publications] 中田 博: "新生化学実験講座3糖タンパク質(下)" 東京化学同人, (1989)

[Publications] 中田 博: "蛋白核酸酵系Tn抗原" 共立出版,

中田博京都産業大学, 工学部・生物工学, 助教授 (90113141)

[Publications] 中田博: "新生化学実験講座3糖タンパク質(下)" 東京化学同人, (1989)

[Publications] 中田博: "蛋白核酸酵系Tn抗原" 共立出版,