1991 Fiscal Year Annual Research Report
光情報による植物の分化・代謝発現とタンパク質リン酸化反応
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02804057
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
田中 重雄 京都大学, 薬学部, 助教授 (30115878)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
河野 通明 岐阜薬科大学, 薬学部, 助教授 (00027335)
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| Keywords | シソ科 / タチジャコウソウ / モノテルペノイド / 腺鱗 / 腺毛 / フィトクロム / 光情報伝達 / リン酸化反応 |
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| Research Abstract |
タチジャコウソウの黄化苗は、受光すると、子葉上に多数の腺鱗を形成し、その中でモノテルペノイドを生合成する。この反応は、ともに光受容体であるフィトクロムの支配を受けている。昨年度、これらの分化・代謝発現とタンパク質リン酸化反応の関係を調べ、以下のような結果を得た。即ち、光処理した実生の子葉から得た蛋白をSDSーPAGEで泳動後、チロシンがリン酸された蛋白をリン酸化チロシン特異抗体を用いて検出した結果、25kDaの蛋白の量が、赤色光照射により増加し、続いて照射した近赤外光により減少した。本蛋白は、赤色光照射後30分に最大となり、3時間後ではほとんど消失することから、シグナル物質として働いている可能性が示唆された。しかし、これらの結果がその後十分に再現できなかったので、種子の光感受性、光処理した後のサンプルの保存法(瞬時の凍結処理、安全光下あるいは暗黒下保存)、細胞破砕法(凍結融解、安全光下など)、蛋白抽出時の添加剤(フォスファタ-ゼの阻害剤、金属トラップ剤、フェノ-ルトラップ剤(PVPP、XADー4)、SH剤、蛋白分解酵素阻害剤など)、特異抗体(モノクロPY20、ポリクロR13)などの要因を検討し、その原因を調査したが、結局究明できず、再現性の点で問題を残した。動物細胞では蛋白量も多く、鮮明な結果が得られることから、植物細胞に特有の問題点かもしれないと考え、培養細胞を用いて検討したところ、18kDaの蛋白のチロシンがリン酸化反応を受けることを見出したが、やはり再現性が低いことが判明した。
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