SV40による細胞の不死化とウィルスゲノム挿入部位の細胞DNAの構造の研究

1990 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 02807030
• Research Institution: University of Occupational and Environmental Health, Japan
• Principal Investigator: 後藤 貞夫 産業医科大学, 医学部, 助教授 (50131917)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 唐崎 裕治 産業医科大学, 医学部, 助手 (20140907) ; 平野 英保 産業医科大学, 医学部, 講師 (50040241)
• Keywords: ヒトセンイ芽細胞 / 不死化 / SV40 / ウィルスゲノムの組み込み / 細胞老化

Research Abstract

SV40でTransformされ且つ不死化した細胞VA13から、ウィルスゲノム近傍の細胞DNAをクロ-ン化した。(VA13細胞ではSV40ゲノムは唯一ケ所に於いてのみ組み込まれている。)ついでこの細胞DNAのSequencingを行って、コンピュ-タ-解析により、その構造の特徴をみた。現在のところ組み込まれたSVA40ゲノムの両側の細胞DNA約1KbのみについてSequencingを行ったばかりであるが、次の如き新たな知見を得た。
1.既に報告されている既知遺伝子とはホモロジ-はなかった。
2.既に報告されているOncogenes又はAntioncogenesとはホモロジ-はなかった。以上のことからVA13細胞に於いて不死化はSV40ゲノムによる癌抑制遺伝子又は癌遺伝子の破壊によってもたらされたものではないことを示唆する。
3.SV40DNAのSequenceSはホモロジ-はなかった。このことはウィルスゲノムの組み込み機構としてNonhomologous Recombinationを示唆するものである。
4.短いDirect及びInverted Repeats(4〜8bp)が数多くみられた。