1990 Fiscal Year Annual Research Report
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02807074
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
小出 典男 岡山大学, 医学部・附属病院, 講師 (20142333)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
武南 達郎 岡山大学, 医学部・附属病院, 医員
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| Keywords | 初代培養肝細胞 / 三次元培養 / 解毒能 / P450 / 人工肝 |
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| Research Abstract |
1.三次元肝細胞凝集魂の調製とその形成促進因子
ラット肝細胞を無血清培地下の非接着環境において培養することにより三次元的肝細胞凝集魂を調製する方法を開発した(Koide,et al.Exp Cell Res,1990)。この三次元的凝集魂の形成を容易にすることを目的とした研究過程から,凝集魂形成促進因子が存在することを明らかにした(Br J cell Bicl,1991,印刷中)。これにより安定した三次元凝集魂形成が行えるようになり,かつ凝集魂の形成機構を研究する糸口も開かれた。
2.三次元肝細胞凝集魂での解毒能
三次元的肝細胞凝集魂に保持されるp450還元酵素をミクロゾ-ム蛋白を抗原としたウェスタンブロット法とDNAプロ-ブを用いたノ-ザンブロット法により検討した。いずれの方法でも,単層培養された肝細胞に比し10〜20倍高いレベルのp450還元酵素が三次元凝集魂に保持されていることが判明した(投稿準備中)。
3.三次元肝細胞凝集魂の循環培養系への組み込み
三次元的肝細胞凝集魂をアルギン酸カルシュ-ムゲルに包埋して循環培養系に組み込んで培養する技術を開発した。この循環培養系ではアルブミン,尿素の合成がゲルに包埋しない静置培養時と同様のレベルで維持されており,解毒能を評価する代謝カラムもしくはハイブリッド型人工肝のプロトタイプモジュ-ルとして利用できる可能性が示唆された(投稿中)。
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[Publications] Norio koide,et al.: "Formation of multicellular spheroids composed of adult rat bepatocytes in dishes with positively eharged surfaces and under other nonadherent environments." Exp.Cell Res.182(2). 227-235 (1990)
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[Publications] Kohosaku sakaguchi,et al: "Promotion of spheroid assembly of adult rat hepatocytes by some factor(s) prasent in the initial 6h iondilioned medium of the primary culture." Br J.Cell Biol.(1991)
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[Publications] Hiroyuki Takabatake,et al: "Encapsulated multieellular spheroids of adult rat hepatocytes continously produce albumin and urea in a sporited bed circulating culture system." Art.Organs.
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[Publications] 高畠 弘行,他: "肝細胞spheroidを利用するハイブリッド型人工肝臓作成に利用可能な基材の検討とそのspheroid形成への影響" 人工臓器. 19(3). 1165-1168 (1990)
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[Publications] 小出 典男,他: "肝細胞spheroid形成" 肝胆膵. 20(4). 585-591 (1990)
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[Publications] 小出 典男,他: "細胞外マトリックス.細胞外マトリックスと肝細胞分化制御" BIO medica. 5(2). 20-24 (1990)
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[Publications] 小出 典男,他: "細胞レベルからみた消化器の機能I.肝.肝特異的分化機能発現に及ぼす細胞形態の影響" 日本医学館, 113 (1990)
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[Publications] 小出 典男,他: "Annual Review消化器1991,II肝臓.肝細胞外マトリックス" 306 (1991)
