上皮成長因子受容体に対するヒト型モノクロ-ナル抗体を用いた新しい癌治療法の開発

1990 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 02807185
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 岡本 哲治 広島大学, 歯学部・附属病院, 講師 (00169153)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高田 和彰 広島大学, 歯学部, 教授 (30029970)
• Keywords: 上皮成長因子 / 上皮成長因子受容体 / モノクロ-ン抗体 / 扁平上皮癌細胞 / 唾液腺腺癌細胞 / 正常上皮細胞 / 体外免疫法 / ヌ-ドマウス移植腫瘍

Research Abstract

動該年度においては昨年度に作製したヒト上皮成長因子受容体(EGFr)対するまウスモノクロ-ナル抗体12ー93,10ー77,を用いて実験を行い以下の結果を得た。
1.12ー93,(1gG_1)10ー77(1gM)抗体はともにリン酸化されたヒトEGFrを免疫沈降した。さらに12ー93はEGFとEGFrとの結合を阻害した。
2.12ー93はEGFrの蛋白を,10ー77はEGFrの血液型A型関連糖鎖を認識することが明らかとなった。
3.口腔癌細胞の増殖に及ぼす12ー93,10ー77抗体の影響を無血清培地(RD6F)を用いて検索を行った結果12ー93は口腔由来扁平上皮癌細胞(SCC)及び唾液腺由来腺癌細胞(SAC)の増殖を抑制した。しかし10ー77は明らかな影響を示さなかった。
4.12ー93抗体を用いて口腔正常上皮細胞並びに口腔癌組織の免疫染色を行った結果正常口腔粘膜では基在Pyの細胞,正常唾液腺では導管上皮細胞に発現を認めた。SCC組織では増殖性の高い腫瘍組織に特に強い発現を認め分化とともにそれは低下した。SACでは導管様構造をとる腫瘍細胞に強い発現を認めた。類表皮癌においては類表皮細胞に発現を認めた。5,ヌ-ドマウス移植SCC,SACの増殖は12ー93抗体の投与により有市に抑制された。
以上の結果からEGFの結合を阻害するヒトEGFrに対するモノクロ-ナル抗体は口腔癌治療に有用性が高いことが明らかとなった。現在、口腔癌患者末梢リンパ球をin vitro immunization法を用いてヒトEGFrで免疫しヒトメヒトハイブリド-マを作製し(EGFr)に対するヒト型モノクロ-ナル抗体を作製中である。

Research Products

• [Publications] Yoshinori Myoken: "On alternative method for the isolation of NSー1hybridism using cholestenol auxotrophy of NSー1mouse myeloma cells" In Uitro Celleelar & Developmental Biology. 25. 477-480 (1989)
• [Publications] 藪本 正文: "正常マウス顎下腺上皮細胞の無血清培養下における株化" 日本口腔外科学会雑誌. 36. 791-801 (1990)
• [Publications] Dianging Wu: "MembraneーBound Transforming Growth factorー2 as on Autocrine Factor for A43 1Human epidermoid cells" Oncogene.
• [Publications] 古江 美保: "口腔領域悪性腫瘍における上皮成長因子受容体の発現" 日本口腔外科学会雑誌. 5. (1991)
• [Publications] 尾崎 輝彦: "口腔由来正常上皮細胞及び口腔癌細胞の無血清培養下での増殖に及ぼすEGF,FGFの影響並びにこれら細胞における受容体解析" 日本口腔外科学会雑誌. 6. (1991)