1992 Fiscal Year Annual Research Report
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03044150
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| Research Institution | Okazaki National Research Institutes |
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Principal Investigator |
江口 吾朗 岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 教授 (80022581)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
坂野 仁 カリフォルニア大学, バークレイ校分子細胞生物学部, 準教授
名川 文清 岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 助手 (10241233)
餅井 真 岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 助手 (90202358)
児玉 隆治 岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 助手 (90161950)
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| Keywords | 色素上皮細胞 / レンズ細胞 / 脱分化 / 再分化 / 分化転換 / 分化の多能性 / 成長因子 / 細胞外基質 |
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| Research Abstract |
研究の第一年度に納めた成果を踏え、当初の研究計画を概ね予定通り実施した。本年度では、色素上皮細胞のレンズ細胞への分化転換過程について、両細胞種の分化状態の調節に関与すると共に、色素上皮細胞の多能的脱分化状態の成立とこの脱分化細胞の分化決定に関与すると想定される2種の遺伝子、pP344とpP64の機能の解析に焦点を絞り、研究を展開し、下記の貴重な成果を得た。
pP344遺伝子cDNAの塩基配列からペプチドを合成し、その抗体を作出した。次に、この抗体を活用し培養色素上皮細胞の培養上清から単一蛋白分子を抽出精製した。その蛋白分子のアミノ酸配列を決定したところ、pP344-cDNAがコードするアミノ酸配列と完全に一致し、精製分子がpP344遺伝子の産物であることを明らかにすることができた。次いで、この蛋白質に強い蛋白分解酵素阻害活性のあることを明らかにすると共に、生体系においても亦培養条件下でも色素上皮細胞はこの分子を活発に合成分泌していることを示すことができた。これらの事実は、pP344遺伝子が常時活性化されていることで色素上皮細胞は、それ自身の細胞外基質の蛋白質分解酵素による分解を抑止し、その分化形質を安定に維持する。したがって、pP344遺伝子の不活性化は色素上皮細胞の脱分化に深く連関するという従来の仮説を強力に支持する。一方、pP64遺伝子の機能についても解析を進め、非常に因難であった。この遺伝子の産物の抗体作出に遂に成功することができ、pP64遺伝子の機能を明らかにして行くための重要な基礎を確立することができた。
このように、本年度の成果は、本共同研究を展開し、本研究の目標を達成する上で、非常に重要な基礎をなすものである。
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[Publications] Jun Kosaka,Kenji Watanbe and Goro Eguchi: "Transdifferentiation of chicken retinal pigmented epithelial cells in serm-free culture." Experimental Eye Research. 55. 261-267 (1992)
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[Publications] Yutaka Imokawa,Shinichi Ono,Takashi,Tekeuchi and Goro Eguchi: "Analysis of a unique molecule responsible for regneration and stabilization of differentiated state of tissue cells." International Journal of Developmental Biology. 36. 399-405 (1992)
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[Publications] Yutaka Imokawa and Goro Eguchi: "Expression and distribution of regeneration-responsive molecule during normal development of the newt,Cynops pyrrhogaster." International Journal of Developmental Biology. 36. 407-412 (1992)
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[Publications] Kaichiro Sawada,Kiyokazu Agata,and Goro Eguchi: "Crystallin gene expression in the process of lentoidogenesis in cultures of chick lens epithelial cells." Experimental Eye Research. 55. 879-887 (1992)
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[Publications] Makoto Mochii,Akeo Iio,Hachiro Yamamoto,Takuji Takeuchi and Goro Eguchi: "Isolation and characterization of chicken tyrosinase cDNA." Pigment Cell Research. 5. 162-167 (1992)
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[Publications] Goro Eguchi: "Progress in Retinal Research 12(N.N.Osvorne and J.Chader,eds.)pp.205-230,Transdifferentition in the vertebrate retinal pigmented epithelial cell." Pergamon Press,Oxford, 287 (1992)
