1991 Fiscal Year Annual Research Report

劣性高発がん性遺伝病細胞における突然変異の解析

Research Project

Project/Area Number	03152066
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	八木孝司京都大学, 医学部, 助教授 (80182301)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	巽純子京都大学, 医学部, 助手 (80128222)
Keywords	高発がん性遺伝病 / DNA修復 / 突然変異 / 色素性乾皮症 / 小脳性運動失調症 / 紫外線 / ガンマ線
Research Abstract	ヒト正常細胞および色素性乾皮症(XP)A,C,F群細胞で生ずる自然突然変異の種類をシャトルベクタ-pZ189を用いて調べた。いずれの細胞においても50%以上は欠失変異であった。残りは塩基対置換変異であり、その中でトランスバ-ジョンの割合が紫外線誘発突然変異の場合と比べて、有意に高かった。紫外線誘発突然変異の場合はいずれの細胞においてもG:C→A:Tトランジションの割合が高いが、XP細胞においてはそれがより有意に高かった。マウス細胞における紫外線誘発突然変異の種類をシャトルベクタ-pYZ289を用いて調べ、ヒト正常およびXP細胞の場合と比較した。塩基対置換変異のうち91%はG:C→A:Tトランジションであり、これはヒトA群XP細胞における紫外線誘発変異の割合に近く、ヒト正常細胞の場合より有意に高かった。これは分子レベルでも質的にマウスのDNA修復は正常ヒトと異なることを示す。ヒト正常細胞および小脳性運動失調症(AT)患者細胞におけるガンマ線誘発突然変異の頻度をpZ189を用いて調べたが、20グレイ照射までは両者に差は見られなかった。DNA二本鎖切断の修復をヒト正常細胞とAT細胞で比較するため、制限酵素AvaIで1カ所切断されるシャトルベクタ-pZ189Avaを作成し、細胞内で起こるDNA鎖再結合の割合と正確さを調べた。両者において、切断されたpZ189Avaが再結合される割合に差がなかったが、再結合の正確さは正常細胞の方が有意に高かった。誤った再結合部の塩基配列変化を調べると、AT細胞においては切断末端部付近の数〜数十塩基の欠失を有するものが大部分であったが、正常細胞ではそれらは少なく、大きな挿入を有するものの割合が高かった。このことはAT細胞のガンマ線高感受性の機構として、DNA二本鎖切断の再結合修復の正確度が低いことがその原因の1つである可能性を示す。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Chikako Nishigori: "Altered O^6-alkylguanine-DNA alkyltransferase activity in cell strains originating from mouse skin tumors induced by UV irradiation." Cancer Research. 51. 2425-2429 (1991)
[Publications] Takashi Yagi: "Analysis of point mutations in an ultraviolet-irradiated shuttle vector plasmid propagated in cells from Japanese xeroderma pigmentosum patients in complementation groups A and F." Cancer Research. 51. 3177-3182 (1991)
[Publications] Mayumi Sato: "Protective effects of sodium selenite on killing and mutation by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine in E.coli." Mutation Research. 250. 73-77 (1991)
[Publications] Suming Wang: "Reduced DNA repair in progeria cells and effects of γーray irradiation on UVーinduced unscheduled DNA synthesis in normal and progeria cells." Mutation Research. 256. 59-66 (1991)
[Publications] Shin-ichi Moriwaki: "Analysis of N-methyl-N-nitrosourea-induced mutations in a shuttle vector plasmid propagated in mouse O^6-methylguanine-DNA methyltransferase-deficient cells in comparison with proficient cells." Cancer Research. 51. 6219-6223 (1991)
[Publications] Takashi Yagi: "UV-induced base substitution mutations in a shuttle vector plasmid propagated in group C xeroderma pigmentosum cells." Mutation Research. (1992)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

劣性高発がん性遺伝病細胞における突然変異の解析

Principal Investigator

八木 孝司 京都大学, 医学部, 助教授 (80182301)

Research Products

[Publications] Chikako Nishigori: "Altered O^6-alkylguanine-DNA alkyltransferase activity in cell strains originating from mouse skin tumors induced by UV irradiation." Cancer Research. 51. 2425-2429 (1991)

[Publications] Takashi Yagi: "Analysis of point mutations in an ultraviolet-irradiated shuttle vector plasmid propagated in cells from Japanese xeroderma pigmentosum patients in complementation groups A and F." Cancer Research. 51. 3177-3182 (1991)

[Publications] Mayumi Sato: "Protective effects of sodium selenite on killing and mutation by N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine in E.coli." Mutation Research. 250. 73-77 (1991)

[Publications] Suming Wang: "Reduced DNA repair in progeria cells and effects of γーray irradiation on UVーinduced unscheduled DNA synthesis in normal and progeria cells." Mutation Research. 256. 59-66 (1991)

[Publications] Shin-ichi Moriwaki: "Analysis of N-methyl-N-nitrosourea-induced mutations in a shuttle vector plasmid propagated in mouse O^6-methylguanine-DNA methyltransferase-deficient cells in comparison with proficient cells." Cancer Research. 51. 6219-6223 (1991)

[Publications] Takashi Yagi: "UV-induced base substitution mutations in a shuttle vector plasmid propagated in group C xeroderma pigmentosum cells." Mutation Research. (1992)

八木孝司京都大学, 医学部, 助教授 (80182301)