1991 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト染色体デイセクションによる外骨腫(がん抑制)遺伝子単離と腫瘍抑制機構

Research Project

Project/Area Number	03258232
Research Institution	Nagasaki University
Principal Investigator	新川詔夫長崎大学, 医学部, 教授 (00111170)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	孫田信一愛知県心身障害者コロニー, 発達障害研究所, 主任研究員 (00100165) 陣野吉廣長崎大学, 医学部, 助手 (20179097)
Keywords	外骨腫遺伝子 / DNAライブラリ- / 欠失分析 / PFGE / 8g23ー24特異的クロ-ン
Research Abstract	<1. 8q23ーq24(外骨腫遺伝子座領域)特異的DNAライブラリ-の作製>___ー:平成2年度の研究で確立した染色体顕微切断・PCR・マイクロクロ-ニング法を用いて、8q23ーq24領域の染色体断片から計3.5×10^4のクロ-ンから成る当該領域プラスミド(puC)ライブラリ-を作製した。PCR産物はin situ hybridizationにより当該領域にマップされた。 <2. 各pUCクロ-ンの性格>___ー: ヒト・マウス雑種細胞パネルを用いたサザン解析により、解析した60個(平均352bp)中、12(20%)クロ-ンはユニ-ク配列、1個はユニ-クと反復両配列をもつもの、25個は反復配列のみ、残りの22個はシグナルなしであった。この12個のユニ-ククロ-ンではPFLPは検出されなかった。 <3. ファ-ジ(ph)クロ-ンの取得>___ー:ファ-ジライブラリ-を500bpのユニ-クpUCクロ-ンで選択し、9.4Kbのinsertをもつphクロ-ンを得た。 <4. TRPS患者における欠失解析>___ー:12個のpUCクロ-ン中8個とphクロ-ンをプロ-ブとし、2名の患者(1例はTRPSI、1例はTRPSII)で欠失分析を行った。4個のpUCクロ-ンは両患者で1コピ-濃度(欠失内部)を示した。phクロ-ンのHindIII消化サブクロ-ンも1コピ-濃度を示した。残りのpUCクロ-ン4個は2コピ-濃度(欠失外部)を示した。 <5. PFGE解析>___ー: phクロ-ンをプロ-ブとして用い、正常ヒトおよびTRPSIとTRPSII患者DNAを4種の希有切断酵素で消化し、PFGE解析を行い、550kbのNotl断片、500kbのMlul断片、450kb/400kb(多分RFLP)のClal断片、および200kbのSall断片を検出した。患者と正常人の断片長差はみられなかった。本年度の研究で得たクロ-ン化DNAは外骨腫遺伝子座位近傍にはあるが、依然双方間に距離がある。外骨腫遺伝子に到達するには、更に多数のクロ-ンの解析を続行する必要がある。

Research Products

(5 results)

All Other

All Publications (5 results)

[Publications] Hirota T,et al.: "Microdissection of human chromosomal regions 8q23.3ーq24.11 and 2q33ーqter:Construction of DNA libraries and isolation of their clones." Genomics(1992).(1992)
[Publications] Deng HーX,et al.: "chromosome handーspecific painting:chromosome in situ sppression hybridization using PCR products from a microdissected chromosome hand as a probe pool." Human Genetics(1992).(1992)
[Publications] Jinno Y,et al.: "A simple and efficient amplification method of DNA with unknown sequences and its application to the microdissection/microcloning." Journal of Biochemistry(1992).(1992)
[Publications] 陣野吉廣,新川詔夫: "染色体切断法を用いた遺伝子解析技術の開発" 代謝(増刊号)「癌 '91」. 28. 171-177 (1991)
[Publications] 新川詔夫: "渋谷正史編「がんのバイオサイエンスI:がん遺伝子と抑制遺伝子」“染色体とがん関連遺伝子" 東京大学出版会, 143 (1991)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト染色体デイセクションによる外骨腫(がん抑制)遺伝子 単離と腫瘍抑制機構

Principal Investigator

新川 詔夫 長崎大学, 医学部, 教授 (00111170)

Research Products

[Publications] Hirota T,et al.: "Microdissection of human chromosomal regions 8q23.3ーq24.11 and 2q33ーqter:Construction of DNA libraries and isolation of their clones." Genomics(1992).(1992)

[Publications] Deng HーX,et al.: "chromosome handーspecific painting:chromosome in situ sppression hybridization using PCR products from a microdissected chromosome hand as a probe pool." Human Genetics(1992).(1992)

[Publications] Jinno Y,et al.: "A simple and efficient amplification method of DNA with unknown sequences and its application to the microdissection/microcloning." Journal of Biochemistry(1992).(1992)

[Publications] 陣野 吉廣,新川 詔夫: "染色体切断法を用いた遺伝子解析技術の開発" 代謝(増刊号)「癌 '91」. 28. 171-177 (1991)

[Publications] 新川 詔夫: "渋谷 正史編「がんのバイオサイエンスI:がん遺伝子と抑制遺伝子」“染色体とがん関連遺伝子" 東京大学出版会, 143 (1991)

ヒト染色体デイセクションによる外骨腫(がん抑制)遺伝子単離と腫瘍抑制機構

新川詔夫長崎大学, 医学部, 教授 (00111170)

[Publications] 陣野吉廣,新川詔夫: "染色体切断法を用いた遺伝子解析技術の開発" 代謝(増刊号)「癌 '91」. 28. 171-177 (1991)

[Publications] 新川詔夫: "渋谷正史編「がんのバイオサイエンスI:がん遺伝子と抑制遺伝子」“染色体とがん関連遺伝子" 東京大学出版会, 143 (1991)