1991 Fiscal Year Annual Research Report

制御蛋白質の機能構造

Research Project

Project/Area Number	03259101
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	饗場弘二名古屋大学, 理学部, 教授 (20025662)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	白川昌宏大阪大学, 蛋白質研究所, 助手 (00202119) 嶋本伸雄国立遺伝学研究所, 助教授 (20127658) 今川正良東京大学, 医学部, 助手 (20136823) 石浜明国立遺伝学研究所, 教授 (80019869) 相本三郎大阪大学, 蛋白質研究所, 助教授 (80029967)
Keywords	DNA結合蛋白質 / 転写制御蛋白質 / タンパク質の機能構造 / タンパク質のドメイン / 立体構造 / DNAー蛋白質相互作用 / 蛋白質ー蛋白質相互作用 / DNAの構造変化
Research Abstract	代表的な転写制御蛋白質と転写酵素RNAポリメラ-ゼの機能構造について、生化学的、分子遺伝学的、構造化学的ならびに合成化学的研究を初年度にひきつづき展開し、以下の成果を得た。 (1)大腸菌CRPのポジティブコントロ-ル変異体(DNAに結合するが転写促進活性を失ったもの)を数種単離し,変異部位の同定および精製タンパクの生化学的特質を明らかにした。 (2)CRPとRNAポリメラ-ゼがDNAヘリックスの同じ側に結合することがCRPの転写活性化にとって重要であることを証明した。 (3)大腸菌の適応的応答に関与するAda蛋白とリン酸レギュロンの制御蛋白質PhoBのDNA結合ドメイン,メチル化またはリン酸化ドメイン,転写活性化ドメインを明らかにした。 (4)大腸菌RNAポルメラ-ゼのαサブユニットのC末側に転写因子(CRP,OmpR,phoB,Ada,その他)と相互作用し転写因子依存性プロモ-タ-からの転写に関与する機能域があることを明らかにした。 (5)ラムダファ-ジCro蛋白質,酵母の転写制御因子(GAL4,Pap1,Pho4)に関し,DNAとの相互に作用により誘起される蛋白質およびDNAの構造変化を明らかにした。 (6)cーMybおよびHu型DNA結合蛋白質HBsのDNA結合ドメインを化学合成した。このペプチドを用いて,第一班の西村はDNA結合ドメインの溶液内構造をNMR等により解明した。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] 饗場弘二: "Molecular mechanism of negative autoregulation of Escherichia coli crp gene" Nucl.Acids Res.19. 4413-4419 (1991)
[Publications] 相本三郎: "Polypeptide synthesis using the Sーalkil thioester of a partially protected peptide segment:Synthesis of the DNAーbinding domain of cーMyb protein(142ー193)ーNH_2" Bull.Chem.Soc.Jpn.64. 111-117 (1991)
[Publications] 石浜明: "Bipartite functional organization of the alpha subunit of Escherichia coli RNA polymerase:Involvement of the Cーterminal region in transcription activation by cAMPーCRP" Cell. 65. 1-20 (1991)
[Publications] 今川正良: "Stringent integrity requirements for both transーactivation and DNAーbinding in a transーactivator,Oct3" Nucl.Acid Res.19. 4503-4508 (1991)
[Publications] 嶋本伸雄: "Requirement for the betaーgammaーpyrophosphate bond of ATP in a stage between transcription initation and elongation by Escherichia coli RNA polymerase" Biochemistry. 30. 1801-1807 (1991)
[Publications] 白川昌宏: "Interaction of the lamdaーcro repressor protein with operator DNA fragments monitored as to amide proton magnetic resonances" J.Mol.Struct. 242. 355-366 (1991)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

制御蛋白質の機能構造

Principal Investigator

饗場 弘二 名古屋大学, 理学部, 教授 (20025662)

Research Products

[Publications] 饗場 弘二: "Molecular mechanism of negative autoregulation of Escherichia coli crp gene" Nucl.Acids Res.19. 4413-4419 (1991)

[Publications] 相本 三郎: "Polypeptide synthesis using the Sーalkil thioester of a partially protected peptide segment:Synthesis of the DNAーbinding domain of cーMyb protein(142ー193)ーNH_2" Bull.Chem.Soc.Jpn.64. 111-117 (1991)

[Publications] 石浜 明: "Bipartite functional organization of the alpha subunit of Escherichia coli RNA polymerase:Involvement of the Cーterminal region in transcription activation by cAMPーCRP" Cell. 65. 1-20 (1991)

[Publications] 今川 正良: "Stringent integrity requirements for both transーactivation and DNAーbinding in a transーactivator,Oct3" Nucl.Acid Res.19. 4503-4508 (1991)

[Publications] 嶋本 伸雄: "Requirement for the betaーgammaーpyrophosphate bond of ATP in a stage between transcription initation and elongation by Escherichia coli RNA polymerase" Biochemistry. 30. 1801-1807 (1991)

[Publications] 白川 昌宏: "Interaction of the lamdaーcro repressor protein with operator DNA fragments monitored as to amide proton magnetic resonances" J.Mol.Struct. 242. 355-366 (1991)

饗場弘二名古屋大学, 理学部, 教授 (20025662)

[Publications] 饗場弘二: "Molecular mechanism of negative autoregulation of Escherichia coli crp gene" Nucl.Acids Res.19. 4413-4419 (1991)

[Publications] 相本三郎: "Polypeptide synthesis using the Sーalkil thioester of a partially protected peptide segment:Synthesis of the DNAーbinding domain of cーMyb protein(142ー193)ーNH_2" Bull.Chem.Soc.Jpn.64. 111-117 (1991)

[Publications] 石浜明: "Bipartite functional organization of the alpha subunit of Escherichia coli RNA polymerase:Involvement of the Cーterminal region in transcription activation by cAMPーCRP" Cell. 65. 1-20 (1991)

[Publications] 今川正良: "Stringent integrity requirements for both transーactivation and DNAーbinding in a transーactivator,Oct3" Nucl.Acid Res.19. 4503-4508 (1991)

[Publications] 嶋本伸雄: "Requirement for the betaーgammaーpyrophosphate bond of ATP in a stage between transcription initation and elongation by Escherichia coli RNA polymerase" Biochemistry. 30. 1801-1807 (1991)

[Publications] 白川昌宏: "Interaction of the lamdaーcro repressor protein with operator DNA fragments monitored as to amide proton magnetic resonances" J.Mol.Struct. 242. 355-366 (1991)