1991 Fiscal Year Annual Research Report

血管内皮及び平滑筋プロスタグランジン受容体とこれを介する収縮弛緩機構の研究

Research Project

Project/Area Number	03268218
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	成宮周京都大学, 医学部, 教授 (70144350)
Keywords	プロスタグランジンE受容体 / トロンボキサン受容体 / アラキドン酸代謝物 / cDNAクロ-ニング / PCR / ロドプシン型受容体
Research Abstract	プロスタグランジン(PG)、トロンボキサン(TX)、ロイコトリエン(LT)などのアラキドン酸代謝物が、血管系で多彩な作用を示すことはよく知られている。これらの作用は各々の代謝物に特異的な受容体を介して発現されていると考えられるが、血管系のどこにどれだけの種類のPG、TX、LT受容体が存在しているかは明らかでない。我々は昨年これら受容体の一つであるヒトTXA_2受容体のcDNAクロ-ニングに初めて成功した。本研究はこの成果をもとに他のPG、LT受容体の構造を明らかにし、これらの血管系における存在、分布と機能を明らかにすることである。このため本年度は以下の研究を行った。 1.マウスTXA受容体のcDNAクロ-ニング. ヒトTXA_2受容体の第3及び第6膜貫通領域のアミノ酸配列に対応するオリゴヌクレオチドを合成し、これを用いてマウス肺cDNAでPCRを行った。これにより418b、p、よりなるcDNA断片を得、これをプロ-ブとしてハイブリダィゼ-ションを行い1個の陽性クロンを得た。このクロンを解析した結果、これが341個のアミノ酸より成るロドプシン型の受容体をコ-ドしていること、この受容体は発現実験よりマウスTXA_2受容体であることが明らかとなった。また、このmRWAが胸腺、脾、肺、腎によく発現されていることが明らかとなった。 2.マウス、PGE受容体(EP3サブタイプ)のcDNAクロ-ニング. 上記cDNA断片をプロ-ブとしてマウスの色々なcDNAライブラリ-でホモDジ-スクリ-ニングを行い、最終的にPー815細胞のライブラリ-より1個の陽性クロンを得た。解析の結果、これが365個のアミノ酸より成る蛋白をコ-ドしていること、これがマウスPGE受容体であることが判明した。この受容体はGi蛋白にカップル(EP_3アゴニストに親和性をもつことから、PGE受容体のEP_3サブタイプであると結論された。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Morii,N.et al.: "Purification of GTPase activating protein specific for the rho gene products." Journal of Biological Chemistry.266. 7646-7650 (1991)
[Publications] Nemoto,Y.et al.: "Clostridium botulinum C3 ADPーribosyltransーferase gene." Journal of Biological Chemistry.266. 19312-19319 (1991)
[Publications] Sugimoto,Y.et al.: "Cloning and expression of a cDNA for mouse prostaglandin E receptor EP3 subtype." Journal of Biological Chemistry.267. (1992)
[Publications] Ushikubi,F.et al.: "Analysis of the defective signal transduction mechanism through the platelet thromboxane A2 receptor in patieng with polycythemia vera." Thrombosis and Haemastasis.(1992)
[Publications] Kozaki,S.et al.: "Immunological characterization of Clostridium butyricum neurotoxin andits trypsin fragment by use of monoclonal antibodies against Clostridium botulinum type E neurotoxin" Infection and Immunity.59. 457-459 (1991)
[Publications] Ogasawara,J.et al.: "Properties of a proteaseーsensitive acceptor component in mouse brain synaptosomes for Clostridium botulinum type B neurotoxin." FEMS Microbiological Letters.79. 351-356 (1991)
[Publications] Narumiya,S.et al.: "rac genes and their products.In“The ras superfamily of GTPase's"." CRC Press, (1992)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

血管内皮及び平滑筋プロスタグランジン受容体とこれを介する収縮弛緩機構の研究

Principal Investigator

成宮 周 京都大学, 医学部, 教授 (70144350)

Research Products

[Publications] Morii,N.et al.: "Purification of GTPase activating protein specific for the rho gene products." Journal of Biological Chemistry.266. 7646-7650 (1991)

[Publications] Nemoto,Y.et al.: "Clostridium botulinum C3 ADPーribosyltransーferase gene." Journal of Biological Chemistry.266. 19312-19319 (1991)

[Publications] Sugimoto,Y.et al.: "Cloning and expression of a cDNA for mouse prostaglandin E receptor EP3 subtype." Journal of Biological Chemistry.267. (1992)

[Publications] Ushikubi,F.et al.: "Analysis of the defective signal transduction mechanism through the platelet thromboxane A2 receptor in patieng with polycythemia vera." Thrombosis and Haemastasis.(1992)

[Publications] Kozaki,S.et al.: "Immunological characterization of Clostridium butyricum neurotoxin andits trypsin fragment by use of monoclonal antibodies against Clostridium botulinum type E neurotoxin" Infection and Immunity.59. 457-459 (1991)

[Publications] Ogasawara,J.et al.: "Properties of a proteaseーsensitive acceptor component in mouse brain synaptosomes for Clostridium botulinum type B neurotoxin." FEMS Microbiological Letters.79. 351-356 (1991)

[Publications] Narumiya,S.et al.: "rac genes and their products.In“The ras superfamily of GTPase's"." CRC Press, (1992)

成宮周京都大学, 医学部, 教授 (70144350)