1991 Fiscal Year Annual Research Report

Tリンパ球抗原レセプタ-に会合するチロシン燐酸化酵素Fynの機能

Research Project

Project/Area Number	03454194
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	片桐拓也東京大学, 医科学研究所, 助手 (70126100)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鈴木元放射線医学総合研究所, 室長 (00179201) 仙波憲太郎東京大学, 医科学研究所, 助手 (70206663) 大海忍東京大学, 医科学研究所, 助教授 (20160046) 豊田裕東京大学, 医科学研究所, 教授 (90050418)
Keywords	Tリンパ球 / 抗原レセプタ- / Fyn / 活性化 / 細胞内情報伝達 / チロシナ燐酸化 / 遺伝子操作 / 再構成実験系
Research Abstract	自己免疫マウスMRL/lprで異常に増生して発症要因との関連が示唆されている異型Tリンパ球においては、チロシンキナ-ゼFyn(p59fyn)の過剰発現が認められるが、こうしたTリンパ球ではfyn mRNAの安定性は正常であるが転写活性が亢進しており、高発現維持機構が働いていることが判明した。またこの異常増生Tリンパ球では約3倍量のFynが抗原レセプタ-(TcR)に会合しており、その結果活性化Tリンパ球と同等の蛋白質分子群のチロシン燐酸化が生じている。FynのTリンバ球活性化に果たす役割を知るため、抗原特異的T細胞ハイブリド-マに種々の変異型fyn遺伝子を導入してその抗原応答性の変化を解析した。その結果、正常型fyn或いは活性型fyn遺伝子の高発現クロ-ンでは抗原刺激後のILー2産生量が増大し、一方、SH2欠失型或いは不活性型fynの高発現クロ-ンでは親株と同等の応答性しか示さなかった。次に、TcR複合体を形成してその情報伝達に重要な役割を演じていることが示唆されている分子CD3ζ鎖のチロシン燐酸化とFynとの関連を調べるため、サル腎細胞へFyn及びζ鎖を共発現させる再構成系を用いて検討した。Fynはζ鎖と安定な複合体を形成し、in vivo及びin vitroでζ鎖をチロシン燐酸化できること、また、この燐酸化にSH2領域が重要な役割をしていることが判明した。更に、fyn遺伝子の発現プラスミドと、cーfos遺伝子及びILー2遺伝子プロモ-タにCAT遺伝子を接続したレポ-タ-プラスミドをT細胞株jurkatに同時移入して、これらの遺伝子の転写活性に及ぼすFynの効果をCATアッセイで解析した。その結果、Fynがcーfos遺伝子及びILー2遺伝子の発現誘導において重要な役割を果たしていることが示唆された。以上の本年度の実験結果から、FynがTリンパ球の抗原応答時の細胞内情報伝達に深く関わっていることが示された。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Katagiri,T.et al.: "Tetraparental mice reveal complex cellular interactions of the mutant,autoimmunityーinducing lpr gene." J.Immunol.(1992)
[Publications] Koyasu,S.et al.: "Phosphorylation of multiple CD3ζ tyiosine residues lends to formation of pp21 in vitro and in vivo:structu changes upon T cell receptor stimulation." J.Biol.Chem.(1992)
[Publications] Katagiri,T.et al.: "Enhanced association of p59^<fyn> tyrosine kinase with T cell antigen recptor in CD4^-CD8^-T cells of lpr/lpr mice" J.Immunol.
[Publications] Takahashi,T.et al.: "Inductive and constitutive expression of fyn gene for proteinーtyrosine kinase in normal and lpr/lpr T cells." J.Immunol.
[Publications] Fusaki,N.et al.: "Enhancement of Tーcell responsiveness by the Tーcell receptor associated tyrosine protein kinase P59^<fyn>"
[Publications] Takeuchi,K.et al.: "The role of proteinーtyrosine kinase p59^<fyn> in activation of T lymphocytes."
[Publications] Katagiri,T.,Kurokawa,A.Urakawa,K.,Sakamoto,A.,Earp,H.S.and Yamamoto: "Action of murine autommuneーaccelerating genes,lprand Yaa: enhanced activity of src family tyrosine kinases in abnormal T and B cells,In “Molecular Approaches to the Study and Treatment of Human Diseases."" Elsevier Science Publishers B.V.Amsterdam, (1992)
[Publications] 片桐拓也: "抗原レセプタ-を介するシグナル伝達とsrcファミリ-キナ-ゼ免疫'91 代謝増刊号" 中山書店, 205 (1991)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

Tリンパ球抗原レセプタ-に会合するチロシン燐酸化酵素Fynの機能

Principal Investigator

片桐 拓也 東京大学, 医科学研究所, 助手 (70126100)

Research Products

[Publications] Katagiri,T.et al.: "Tetraparental mice reveal complex cellular interactions of the mutant,autoimmunityーinducing lpr gene." J.Immunol.(1992)

[Publications] Koyasu,S.et al.: "Phosphorylation of multiple CD3ζ tyiosine residues lends to formation of pp21 in vitro and in vivo:structu changes upon T cell receptor stimulation." J.Biol.Chem.(1992)

[Publications] Katagiri,T.et al.: "Enhanced association of p59^<fyn> tyrosine kinase with T cell antigen recptor in CD4^-CD8^-T cells of lpr/lpr mice" J.Immunol.

[Publications] Takahashi,T.et al.: "Inductive and constitutive expression of fyn gene for proteinーtyrosine kinase in normal and lpr/lpr T cells." J.Immunol.

[Publications] Fusaki,N.et al.: "Enhancement of Tーcell responsiveness by the Tーcell receptor associated tyrosine protein kinase P59^<fyn>"

[Publications] Takeuchi,K.et al.: "The role of proteinーtyrosine kinase p59^<fyn> in activation of T lymphocytes."

[Publications] 片桐 拓也: "抗原レセプタ-を介するシグナル伝達とsrcファミリ-キナ-ゼ免疫'91 代謝増刊号" 中山書店, 205 (1991)

片桐拓也東京大学, 医科学研究所, 助手 (70126100)

[Publications] 片桐拓也: "抗原レセプタ-を介するシグナル伝達とsrcファミリ-キナ-ゼ免疫'91 代謝増刊号" 中山書店, 205 (1991)