1993 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト特異的DNA領域の検出とその個体識別法への応用

Research Project

Project/Area Number	03454213
Research Institution	University of Tsukuba
Principal Investigator	三澤章吾筑波大学, 社会医学系, 教授 (50086534)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	植田信太郎東京大学, 理学部, 助教授 (20143357) 田中栄之介筑波大学, 社会医学系, 講師 (30138416) 原田勝二筑波大学, 社会医学系, 助教授 (60086618)
Keywords	DNA多型 / PCR法 / ヒト特異性DNA / 人獣鑑別 / マイクロサテライト / ゲノム・サブトラクション / チンパンジー・ゲノムDNA / 人種特異的DNA
Research Abstract	1.本研究では、シト特異的な遺伝子領域を得る手段として、ヒトのゲノムDNAからヒトに最も近縁な種として考えられるチンパンジーのゲノムDNAを差し引くゲノム・サブトラクションという手法を採用した。その結果ヒト特異的DNA断片と考えられる1クローン(PER5)を検出した。PER5を含むヒト・チンパンジーのDNA領域の全塩基配列を調べ、ヒトのみに存在し、チンパンジーには存在しかい2282塩基対のヒト特異的DNA領域(HS5)を得ることができた。このHS5をプローブとしてヒトtotalDNAとの間でサザンハイブリダイゼーションを行うと、3大人種の個体例に例外なく単一のハンドが得られ、性差、個体差はなく、この領域はヒトゲノム中にのみ存在していることが明らかになった。 HS5をプローブとして、人獣鑑別の目的でヒト以外の霊長類(チンパンジー、オラウータン、テナガザル、カニクイザル、キツネザル)およびイヌ、ウサギ、マウス、ニワトリのDNAを用いたZoo-blottingを行ったところ、バンドの出現は認められなかった。ヒト血痕についても検査したところ、6ヵ月経過血痕(DNA0.1μg、血液0.2〜0.3ml相当)まで検出が可能であった。 2.ゲノム・サブトラクション過程で、ヒトで特にコピー数が多く、マカクやラットでは少ない反復配列DNAを得た。これはSau3Aファミリーであり、68塩基対を反復単位としている。このSau3A配列について霊長類について調べたところ、ヒトと特にヒトに近縁な類人猿で顕著に増幅していることがわかった。ヒト、類人猿、旧世界ザル、新世界ザルのDNAとSau3Aリピート配列をプローブとしてサザン法で調べると、得られるバンドの数は、ヒト、チンパンジー、ゴリラの順で減少した。この他の霊長類ではバンドは認められなかった。またゴリラゲノムとのみ90%のホモロジーをもつことが明らかになった。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 三澤章吾: "血液にみられる遺伝的多型の法医人類学への応用" 日本法医学雑誌. 45. 265-276 (1991)
[Publications] Kurosaki,K.: "Dinucleotide Repeat Polymorphism at Apolipoprotein AII Locus:Phenotyping from Peripheral Blood and Hair." Jpn J Legal Med. 46. 1-6 (1992)
[Publications] Washio,K.: "Human Evolution and Human-Specific DNA Sequences" TOPICS IN PRIMATOLOGY. 359-367 (1992)
[Publications] Harada,S.: "Detection of GST1 gene deletion by the polymerase chain reaction and its possible correlation with stomach cancer in Japanese." Hum Genet.90. 62-64 (1992)
[Publications] Washio,K.: "Genetic Identification of Nonhuman Primates using Tandem-Repetitive DNA Sequences." Paternity in Primates:Genetic tests and theories. 53-62 (1992)
[Publications] 本田克也: "ミトコンドリアDNA-V領域のPCR-硬組織によるDNA型判定-" 法医学の実際と研究. 36. 21-25 (1993)
[Publications] 原田勝二編: "ヒトDNA Polymorphism-検出技術と応用" 東洋書店, 299 (1991)
[Publications] 三澤章吾・原田勝二編: "DNA多型研究の新しい展開" 文光堂, 164 (1993)

1993 Fiscal Year Annual Research Report

ヒト特異的DNA領域の検出とその個体識別法への応用

Principal Investigator

三澤 章吾 筑波大学, 社会医学系, 教授 (50086534)

Research Products

[Publications] 三澤章吾: "血液にみられる遺伝的多型の法医人類学への応用" 日本法医学雑誌. 45. 265-276 (1991)

[Publications] Kurosaki,K.: "Dinucleotide Repeat Polymorphism at Apolipoprotein AII Locus:Phenotyping from Peripheral Blood and Hair." Jpn J Legal Med. 46. 1-6 (1992)

[Publications] Washio,K.: "Human Evolution and Human-Specific DNA Sequences" TOPICS IN PRIMATOLOGY. 359-367 (1992)

[Publications] Harada,S.: "Detection of GST1 gene deletion by the polymerase chain reaction and its possible correlation with stomach cancer in Japanese." Hum Genet.90. 62-64 (1992)

[Publications] Washio,K.: "Genetic Identification of Nonhuman Primates using Tandem-Repetitive DNA Sequences." Paternity in Primates:Genetic tests and theories. 53-62 (1992)

[Publications] 本田克也: "ミトコンドリアDNA-V領域のPCR-硬組織によるDNA型判定-" 法医学の実際と研究. 36. 21-25 (1993)

[Publications] 原田勝二 編: "ヒトDNA Polymorphism-検出技術と応用" 東洋書店, 299 (1991)

[Publications] 三澤章吾・原田勝二 編: "DNA多型研究の新しい展開" 文光堂, 164 (1993)

三澤章吾筑波大学, 社会医学系, 教授 (50086534)

[Publications] 原田勝二編: "ヒトDNA Polymorphism-検出技術と応用" 東洋書店, 299 (1991)

[Publications] 三澤章吾・原田勝二編: "DNA多型研究の新しい展開" 文光堂, 164 (1993)