C型肝炎ウイルス(HCV)の変異の解析とワクチン開発への考察

1992 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 03454228
• Research Institution: Kagoshima University
• Principal Investigator: 有馬 暉勝 鹿児島大学, 医学部, 教授 (10116428)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 前田 栄樹 鹿児島大学, 医学部・附属病院, 助手 (70238856)
• Keywords: C型肝炎ウイルス(HCV) / 遺伝子クローニング / 免疫スクリーニング / HCV抗体 / HCV-RNA / ポリメラーゼチェインリアクション(PCR) / ウイルス変異 / ワクチン

Research Abstract

C型肝炎ウィルス(HCV)の遺伝子構造が明らかにされ、診断面では各種第二世代のHCV抗体の開発により十分な感度で血清診断が可能となった。我々も独自にHCVの遺伝子のクローニングを行い、コア抗原と非構造蛋白(NS3領域)との複合抗原を用いた高感度の新しいHCV抗体検出系を開発した。
1.HCV遺伝子の免疫スクリーニングによるクローニング
C型肝炎患者血清よりAGPC法によりRNAを抽出し、ランダムプライマーを用いてλgtII-cDNAライブラリーを作成し、患者(急性C型肝炎患者回復期および慢性C型肝炎)血清を抗体として用いクローニングを行った。患者プール血清よりスタートしたひとつのcDNAライブラリーから幸運にも構造蛋白領域をコードするクローン2個を含むHCVの各領域の特異的cDNAクローンを得た。
2.新しい高感度HCV抗体検出系の開発
コア領域をコードするS29抗原とNS3領域をコードするS4抗原の混合抗原を用いたELISAによるHCV抗体測定系はきわめて高感度であり、現在開発されている第二世代HCV抗体検出系(アボットII)と同等以上の感度、特異性を有し、臨床応用が期待される。

Research Products

• [Publications] M.Oshima: "cDNA clones of Japanese Hepatitis C virus genomes derived from a single patient show sequence heterogenity" Journal of General Virology. 72. 2805-2809 (1991)
• [Publications] 庄 幸彦: "C型肝炎-診断と治療の展望" 消化器外科. 14. 1725-1731 (1991)
• [Publications] 庄 幸彦: "新しいC型肝炎ウイルス関連抗体系" 医学のあゆみ. 160. 308-312 (1992)
• [Publications] 庄 幸彦: "HCVマーカーの臨床的意義-N14抗体の特性はどうでしょうか?-" 治療. 74. 2050-2053 (1992)
• [Publications] 前田 栄樹: "分子生物学からみたC型肝炎ウイルス" Modern Physician. 12. 1343-1346 (1992)
• [Publications] 庄 幸彦: "東レ高感度HCV抗体診断キット(ELISA)による臨床的検討" 医学と薬学. 28. 1299-1305 (1992)