1992 Fiscal Year Annual Research Report
支持細胞と接着して増殖する未熟骨髄性白血病細胞株を用いた造血幹細胞増殖機構の解析
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03454260
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| Research Institution | RESEARCH INSTITUTE FOR TUBERCULOSIS AND CANCER, TOHOKU UNIVERSITY (RITC,TU) |
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Principal Investigator |
土屋 滋 東北大学, 抗酸菌病研究所, 助教授 (30124605)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
峯岸 正好 東北大学, 抗酸菌病研究所, 助手 (20211592)
佐藤 徹雄 東北大学, 抗酸菌病研究所, 助手 (90170761)
今野 多助 東北大学, 抗酸菌病研究所, 教授 (00004846)
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| Keywords | 未熟骨髄性白血病細胞株 / 支持細胞依存性 / 液性因子 / GM-CSF / 造血幹細胞 |
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| Research Abstract |
ヒト胎児肺由来線維芽細胞HEL-O上で増殖するヒト白血病細胞株M-MOKを樹立した。組織化学的にはM-MOKはPOX陰性、エステラーゼ二重染色陰性。表面マーカー解析では、CD34+,CD33+,CD41+,CD42b+であり、DR抗原やグライコフォリンは認められない。HEL-O上のM-MOKの増殖が、HEL-Oとの直接的接触に依存するのか、あるいはまたHEL-O由来の可溶性因子に依存するのかを明らかにするために、両者の間をヌクレオポア-メンブランで隔て、M-MOK細胞の増殖を調べた。M-MOKはHEL-Oとヌクレオポア-メンブランで隔てられていても十分に増殖することから、HEL-O由来の可溶性因子がM-MOKの増殖を支持しているものと思われた。HEL-O由来のコンディションドメヂウムを培地に添加しM-MOKを培養したところ、少なくとも1カ月間はM-MOKの増殖を維持出来ることがわかった。HEL-Oと共存させたM-MOKに、種々の増殖因子あるいは細胞接着因子・レセプターに対する抗体を添加し、M-MOK細胞の増殖に与える影響について検討した。使用した7種類の抗体のうち、抗GM-CSF抗体のみが著名にM-MOK細胞の増殖を抑制した。コンディションドメヂウムによって維持されているM-MOKの増殖も、抗GM-CSF抗体によって著名に抑制された。HEL-OおよびM-MOKの産生するサイトカインについて検索するため、それぞれからRNAを抽出しノーザンブロットハイブリダイゼーションを行った。GM-CSFのプローブを用いた時に、HEL-OおよびM-MOKに陽性のバンドが検出できた。従ってHEL-O上に置かれたM-MOKの増殖機構のうち、可溶性因子が果たす増殖支持作用には、GM-CSFが大きく関与していることが明らかにされた。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Masayoshi Minegishi et al.: "A Japanese famrily pedigree of patients with severecombined immunodeficiency cliseaseurth X-linked in heritance" Jap.J.Ham.Genet.36. 137-142 (1991)
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[Publications] Yoshiyuki Ohash et al.: "Ceuti-LFA-1 antibody tveatment of a patient with steroidtesistont seuere groft vs bost desease." Tohoku J.Eop.Med.167. 297-299 (1992)
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[Publications] Yuzo Jwaski et al.: "Subacute panencephalitis associated with chtonie GVHD" Eur.J.Pathology.
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[Publications] Shigeru Tsuchiya et al.: "Allogeneie fone masrow transplantation for malignant hematological discrdens in clildren."
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[Publications] Masayoshi Itano et al.: "Mass Screening for neuroblastima in Miyagi Prefecture."
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[Publications] Masayoshi Itano et al.: "Establishment and charactcuization of an immature myeloid cell line,M-MOK,grown in the presence of bitroflasts-peeder cells."
