1991 Fiscal Year Annual Research Report

^<31>PーMRSによる培養神経芽腫細胞の代謝に関する研究

Research Project

Project/Area Number	03454268
Research Institution	Kyoto Prefectural University of Medicine
Principal Investigator	沢田淳京都府立医科大学, 医学部, 教授 (10079874)
Keywords	^<31>PーMRS / 神経芽腫 / 培養細胞 / ホロ-ファイバ- / 高密度細胞培養
Research Abstract	(1)当初の計画のとおりに、新たな患児よりヒト神経芽腫細胞株の樹立に成功している。 (2)大量培養については、ホロ-ファイバ-(HollowーFiber:HF)培養方法(HF法)を用いている。細胞は当科で樹立したヒト神経芽腫細胞株KPーNーRTBMIを、HFはグレ-スジャパン社アミコン,ミニヴィタファイバ-を用いた(中空糸500本,内径/外径200/350μm,膜面積約300cm^2,ECS約70ml,分画分子量30000)。HF内に1×10^8個の細胞を注入し、細胞が中空糸へ着床した後より中空糸内空間(intracapillary space:ICS)を25ml/minの流速で,24時間後より中空糸外空間(extracapillary space:ECS)を8ml/hrの流速で、培養液を潅流し長期間培養した。HFの中空糸膜は限外濾過膜となっているため、増殖に高分子蛋白が不可欠な細胞株はHF法には適さない。本系ではそれを克服するために、ECSの潅流を試み成功した。またECSの潅流により迅速な薬剤負荷が可能であると考えられた。 (3)Phosphorusー31 nuclear magnetic resonance spectroscopy( ^<31>PーMRS)の測定は潅流条件下で培養環境の恒常性を維持しつつ、積算回数2000で行なった(測定条件:繰返し時間2.0sec,60°パルス幅,81.134MHz)。MRS装置はGE社CSIーIIで、20mm径のコイルを装着した自家製プロ-プを用いた。培養14日目で明瞭なスペクトルが得られ、ヒト培養神経芽腫細胞の ^<31>PーMRS測定に成功した。一般にHF法の欠点として、ICS容積が大きいこと,潅流圧が高いことなどがある。今回良好なスペクトルが得られたことより、HF法によりMRS分析に必要な高密度細胞培養が可能であることが示された。 (4)chemical siftよりピ-クはPME,Pi,PDE,PCr,γーATP,αーATP,βーATPであった。腫瘍組織におけるin vivo ^<31>PーMRSと同様に、PMEは高くPCrは低い傾向が示された。

Research Products
(4 results)

All Other

All Publications (4 results)

[Publications] T.Cugimoto: "Alphaーsmooth muscle actinーand desmin expressions in human neuroblastoma cell lines" Int.J.Cancer. (1991)
[Publications] H.Kuroda: "Different drug sensitivity in two neuroblastoma cell lines established from the same patient before and after chemotherpy" Int.J.Cancer. (1991)
[Publications] 四方卓磨: " ^<31>PーMRSによる神経芽腫培養細胞の基礎的研究ーホロ-ファイバ-式培養方法を用いてー" 小児がん学会雑誌,第7回日本小児がん学会(1991年12月6,7日,横浜)抄録集. (1991)
[Publications] 四方卓磨: "腫瘍細胞のホロ-ファイバ-式培養での ^<31>PーNMR" 日本磁気共鳴医学会雑誌,第19回日本磁気共鳴医学会大会(1992年3月23,24,東京)抄録集. (1992)

1991 Fiscal Year Annual Research Report

^<31>PーMRSによる培養神経芽腫細胞の代謝に関する研究

Principal Investigator

沢田 淳 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (10079874)

Research Products

[Publications] T.Cugimoto: "Alphaーsmooth muscle actinーand desmin expressions in human neuroblastoma cell lines" Int.J.Cancer. (1991)

[Publications] H.Kuroda: "Different drug sensitivity in two neuroblastoma cell lines established from the same patient before and after chemotherpy" Int.J.Cancer. (1991)

[Publications] 四方 卓磨: " ^<31>PーMRSによる神経芽腫培養細胞の基礎的研究ーホロ-ファイバ-式培養方法を用いてー" 小児がん学会雑誌,第7回日本小児がん学会(1991年12月6,7日,横浜)抄録集. (1991)

[Publications] 四方 卓磨: "腫瘍細胞のホロ-ファイバ-式培養での ^<31>PーNMR" 日本磁気共鳴医学会雑誌,第19回日本磁気共鳴医学会大会(1992年3月23,24,東京)抄録集. (1992)

沢田淳京都府立医科大学, 医学部, 教授 (10079874)

[Publications] 四方卓磨: " ^<31>PーMRSによる神経芽腫培養細胞の基礎的研究ーホロ-ファイバ-式培養方法を用いてー" 小児がん学会雑誌,第7回日本小児がん学会(1991年12月6,7日,横浜)抄録集. (1991)

[Publications] 四方卓磨: "腫瘍細胞のホロ-ファイバ-式培養での ^<31>PーNMR" 日本磁気共鳴医学会雑誌,第19回日本磁気共鳴医学会大会(1992年3月23,24,東京)抄録集. (1992)