骨内非コラ-ゲン蛋白を指標にした骨粗鬆症の診断への応用と骨内成長因子の効果

1991 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 03454367
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 松山 敏勝 札幌医科大学, 医学部, 助手 (20190548)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 賀来 亨 東日本学園大学, 歯学部, 教授 ; 森 道夫 札幌医科大学, 医学部, 教授 (00045288) ; 石井 清一 札幌医科大学, 医学部, 教授 (20001000)
• Keywords: 骨粗鬆症 / 診断法 / 骨内成長因子 / 骨内非コラ-ゲン蛋白

Research Abstract

本研究の目的は、骨粗鬆症の発症病態について細胞レベルで解明するために、ヒト骨組織より培養細胞株の樹立をはかるとともに各種骨内成長因子の作用機序を解媒する。さらに、各種骨内非コラ-ゲン蛋白を指標に、臨床的骨粗鬆症の診断法を確立するものである。そのため、平成3年度は(1)ヒト骨組織より骨培養細胞株を樹立する。(2)各種の骨内非コラ-ゲン蛋白の精製、抗体の作製を行なう。(3)得られた抗体蛋白を用いて免疫酵素抗体法による臨床的血清診断法を確立する。(4)各種の骨代謝疾患患者における血清診断法の意義を解析する。以上の4点について研究をすすめた。(1)に関しては、骨粗鬆症患者よりは細胞収量は少なく材料をヒト胎児骨に変更した。そしてコラ-ゲン処理によって得た単離細胞をSV40よりトランフェクションして細胞株化に成功した。現在、各種骨内成長因子の作用を解析している。(2)に関しては、BGPは、既にモノクロナ-ル抗体の作製と免疫組織化学的診断の有用性について解析し報告した(後述(3))。現在、BSPとOsteonectinの精製が終了し、モノクロナ-ル抗体を作製中である。 以上の研究成果は平成4年日本整形科学会基礎学術集会に発表を予定している。(3)に関して、当初ELISA法を検討していたが、測定値の再現率が悪く、現在RIA法での測定へと方法を変更中である。このため、(4)の各種骨代謝疾患に対する解析は本年度まだ行なわれていない。しかし、現在骨粗鬆症専門外来を行ない登録患者は600名を越え、それら症例の血清、尿検体は確保している。(後述(4)(5)(6))。以上本年度は血清診断法が確立できなかったことを除き、ほぼ計画どおりの研究をすすめることができたと考えている。

Research Products

• [Publications] 松山 敏勝: "米国Loma Linda大学骨代謝クリニックにおけるフルオランドを中心とした骨粗鬆症" 整形外科. 42. 279-283 (1991)
• [Publications] Matsuyama,T: "Skeletal Alkaline Phosphatase specitic activity is an index of the osteoblastic phenotype in subpopulations of the human osteosarcoma cell line Saosー2" Metabolisn. 40. 664-671 (1991)
• [Publications] Ohta,T: "Production of monoclonal antibodies specific for human bone γーcarboxyglutamic acid comtaining protein." Virchow Arch A Pathol Anat.418. 499-502 (1991)
• [Publications] 大寺 浩造: "女性腰痛患者における各種骨塩定量法による腰椎骨塩量についての研究" 北海道整形災害外科学会誌.
• [Publications] 松山 敏勝: "我々の細粗鬆症専門外来の1年のまとめ" 北海道整形災害外科学会誌.
• [Publications] 松山 敏勝: "腰椎骨塩量の測定に対する各種骨塩定量法の比較" 整形外科.