1991 Fiscal Year Annual Research Report
血液幹細胞に特異的に発現される分子の発現調節とその機能解析
Project/Area Number |
03454526
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Research Institution | Jichi Medical University |
Principal Investigator |
須田 年生 自治医科大学, 医学部, 助教授 (60118453)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
今川 重彦 自治医科大学, 医学部, 助手 (60231164)
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Keywords | CD34 / 血液幹細胞 / SCF / Cーkit |
Research Abstract |
血液幹細胞は、多分化能をもつと同時に造血系を推持する自己複製能を有すると考えられる。このような幹細胞は、血液全有核細胞10^5個に1個の頻度で存在する。我々は、ヒト血液幹細胞の純化の研究を通して、CD34抗原が幹細胞の機能を相関することを見出してきた。今年度は、このCD34抗原の機能を実験医学的にアプロ-チするため、マウスCD34遺伝子のクロ-ニングを行なった。CD34抗原mRNAはcーkitmRNAと同様、骨髄、脾、胸線などの造血組織の他、脳、睾丸で高い発現を認めた。また、胎仔肝では胎生12〜14日目までその発現を認めた。さらに、Alternative splicingにより、細胞質内ドメインの長さの異なる二つのクロ-ンが存在し、その発現比が組織によって異なることを明らかにした。今後、in situ hybridizationや新たに作製したマウスCD34に対する抗体を用いて、細胞レベルでの分子の発現を検索していく予定である。 一方、マウス血液幹細胞純化の研究においては、系統特異抗原(Lin)陰性 cーkit分子陽性の細胞をさらに分画して、Scaー1陽性細胞か最も未分化な細胞であることを明らかにした。すなわち、Lin^ーScaー1^+cーkit^+細胞は、骨髄有核細胞の0.04〜0.08%を占め、cloy12CFUーSなど未分化幹細胞だけを含む集団であった。これらの細胞は,ILー3,ILー6に対しては数%しか反応しないが、Stem cell Factor(SCF)を含む条件では約半数の細胞が反応して、コロニ-を形成した。このことから、cーkit/SCFの系は最も未分化な幹細胞の増殖において重要と考えられた。 来年度は、この未分化幹細胞集団から、RTーPCR法を用い、新しいチロシンキナ-ゼ型遺伝子のクロ-ニングを試みる予定である。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Okada,S.: "Effect of interleukin 3,interleukin 6,and granulocyte colony stimulating factor on sorted murine splenic progenitor cells." Exp.Hematol.19. 42-46 (1991)
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[Publications] Ema,H.: "Multipotent and committed CD34^+ cells in bone marrow transplantation" Jpn.Cancer Res.82. 547-552 (1991)
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[Publications] Tanaka,T.: "Stimulatory effects of granulocyte colony stimulating factor on CFUーS differentiation and preーCFUーS proliferation in mice." BLOOD. 77. 2597-2602 (1991)
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[Publications] Gunji,Y.: "Support of early B cell differentiation in mouse fetal liver by stroma cells and interleukinー7" BLOOD. 77. 2612-2617 (1991)
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[Publications] Tsunoda,JーI.: "In vitro stem cell function of interleukinー3ーinduced blast cells." BLOOD. 78. 318-322 (1991)
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[Publications] Okada,S.: "Enrichment and characterization of murine hemopoietic stem cells that express cーkit molecule." BLOOD. 78. 1706-1712 (1991)