1992 Fiscal Year Annual Research Report

血液幹細胞に特異的に発現される分子の発現調節とその機能解析

Research Project

Project/Area Number	03454526
Research Institution	Jichi Medical School
Principal Investigator	須田年生自治医科大学, 医学部, 助教授 (60118453)
Keywords	受容体型チロシンキナーゼ / 血液幹細胞 / FACS / CD34 / c-kit
Research Abstract	多分化能と自己複製能をもつと考えられる血液幹細胞は、単クローン抗体を用いたFACSによる分離によって、ほとんど1:1に純化できるようになった。昨年度からの解析により、マウス、ヒト血液幹細胞ともに、SCFの受容体型チロシンキナーゼであるc-kit分子を低発現していることが明らかとなった。また最近、flk-2も幹細胞に発現されていることが報告された。これらの他に未知のチロシンキナーゼ受容体が存在することは、十分に想像されることである。本年度は、幹細胞に発現される遺伝子のうち、この受容体型チロシンキナーゼについて検討した。FACSで分離したマウス血液幹細胞(分化抗原陰性、c-kit陽性、Sca-1陽性)5000個からRNAを調製し、チロシンキナーゼのサブドメインをプライマーとしてPCRを行い、約100個のクローンの塩基配列を検討した。このうち受容体型チロシンキナーゼは、10種13クローンで、eck,IGFR,c-kit,flk-1,flk-2,flt-4,jilの他に、metに類似した新規の遺伝子であった。このうち、結合因子が明らかなのはインスリン様成長因子とSCFだけである。今後、これらの結合因子を探索し、その血液幹細胞に及ぼす作用を検討していく必要があると思われる。更に、svc型遺伝子は8種37クローン得られた。その中には、最近、無ガンマグロブリン血症で異常のあることが明らかとなったatkも含まれており、幹細胞からB細胞へ分化する過程でいかなる役割を果たしているのか、興味がある。また、昨年度から引続き、幹細胞特異的抗原であるCD34の遺伝子発現調節を検討するために、genomic DNAをクローニングし、現在CATアッセイを行っている。今後、CD34分子の機能を個体レベルで明らかにするために、トランジェニックマウスの作成およびジーンターゲッティングを行う予定である。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Okada,S.et al: "Sequential analysis of hemopoietic reconstitution achieved by transplantation of hemopoietic stem cells." Blood. (1993)
[Publications] Miura,N.et al: "Stem cell factor and IL-6 preferentially support the proliferation of kit-positive hemopoietic progenitors rather than their differentiation." Exp.Hematol.21. 143-149 (1993)
[Publications] Okada,S.et al: "In vivo and in vitro stem cell function of c-kit and Sca-1-positive hemopoietic cells." Blood. 80. 3044-3050 (1992)
[Publications] Kodama,H.et al: "In vitro proliferation of primitive hemopoietic stem cells supported by stromal cells:Evidence for the presence of a mechanism(s)other than invoving c-kit receptor and its ligand." J.Exp.Med.176. 351-361 (1992)
[Publications] Gunji,Y.et al: "Expression and function of adhesion molecules on human hemopoietic stem cells:CD34^+LFA-1^- are more primitive than CD34^+LFA-1^+ cells." Blood. 79. 429-436 (1992)
[Publications] Suda,J.et al: "Two types of murine CD34 mRNA generated by alternative splicing" Blood. 79. 2288-2295 (1992)
[Publications] 須田年生: "血液幹細胞の運命" 羊工社, 141 (1992)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

血液幹細胞に特異的に発現される分子の発現調節とその機能解析

Principal Investigator

須田 年生 自治医科大学, 医学部, 助教授 (60118453)

Research Products

[Publications] Okada,S.et al: "Sequential analysis of hemopoietic reconstitution achieved by transplantation of hemopoietic stem cells." Blood. (1993)

[Publications] Miura,N.et al: "Stem cell factor and IL-6 preferentially support the proliferation of kit-positive hemopoietic progenitors rather than their differentiation." Exp.Hematol.21. 143-149 (1993)

[Publications] Okada,S.et al: "In vivo and in vitro stem cell function of c-kit and Sca-1-positive hemopoietic cells." Blood. 80. 3044-3050 (1992)

[Publications] Kodama,H.et al: "In vitro proliferation of primitive hemopoietic stem cells supported by stromal cells:Evidence for the presence of a mechanism(s)other than invoving c-kit receptor and its ligand." J.Exp.Med.176. 351-361 (1992)

[Publications] Gunji,Y.et al: "Expression and function of adhesion molecules on human hemopoietic stem cells:CD34^+LFA-1^- are more primitive than CD34^+LFA-1^+ cells." Blood. 79. 429-436 (1992)

[Publications] Suda,J.et al: "Two types of murine CD34 mRNA generated by alternative splicing" Blood. 79. 2288-2295 (1992)

[Publications] 須田 年生: "血液幹細胞の運命" 羊工社, 141 (1992)

須田年生自治医科大学, 医学部, 助教授 (60118453)

[Publications] 須田年生: "血液幹細胞の運命" 羊工社, 141 (1992)