1992 Fiscal Year Annual Research Report

活性化T細胞におけるシグナル伝達とIL-3とGM-CSF遺伝子の発現機構の解析

Research Project

Project/Area Number	03454544
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	横田崇東京大学, 医科学研究所, 助教授 (50134622)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	村松正明東京大学, 医科学研究所, 教務職員 (50230008) 新井賢一東京大学, 医科学研究所, 教授 (00012782)
Keywords	インターロイキン3 / コロニー刺激因子 / シグナル伝達 / DNA結合タンパク質 / 転写因子 / エンハンサー配列 / トランスアクチベーター / シス調節領域
Research Abstract	T細胞におけるリンホカイン遺伝子活性化にはカルシウムとPMAシグナルが関与する。両シグナルに応答するGM-CSFプロモーターのcis調節領域としてこれまでにCLE2/GC-boxおよびCLEOを同定したが、HTLV-I TAXによるGM-CSFプロモーターの活性化にはCLE2/GC-boxのみで充分であり、CLEOは必須でないことから両者の活性化機構が異なることを示した。CLE2/GC-boxは免疫グロブリンк鎖遺伝子に存在するNF-кB結合部位と配列上相同であるが機能的にも交換可能であることを示した。CLE2/GC-box/CLEOはカルシウムとPMAシグナルに応答する機能単位であり、GM-CSFだけでなく他のプロモーターをも活性化しうることを示した。HTLV-I TAXに応答する IL-3プロモーターのCT/GC richエレメントをプローブとしてDNA結合蛋白質cDNAをSouthwestern法によりスクリーニングし、EGR1,2に加えてZincフィンガーモチーフを持つ新規クローンDB1を単離、同定した。これらのZincフィンガー蛋白質はIL-3プロモーターを上流配列および刺激依存的に活性化した。さらに我々はIL-5プロモーターはマウス胸腺細胞腫EL-4においてcAMPとPMAの二種類のシグナルの共同によって50倍以上活性化されることを明らかにし、cAMPとPMAに応答するIL-5プロモータのcis調節領域を同定した。cAMPは対照的にPMA刺激により活性化されるIL-2,GM-CSF,IL-4,IL-10遺伝子の発現を強く抑制する。これまでIL-5プロモーター活性化シグナルは不明であったが、PMAとカルシウムシグナルと共にPKAを通したシグナルがT胞細活性化の制御に関与することを示した。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Nakayama,N.et al.: "Use of mammalian cell expression cloning systems to identify genes for cytokines,receptors." Current Opin.Biotechnology. 3. 497-505 (1992)
[Publications] Watanabe,S.et al.: "Reconstituted human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor receptor transduces growth promoting signals in mouse NIH3T3 cells." Mol.Cell.Biol.13. (1993)
[Publications] Koyano,N.et al.: "Reconstition of the functional GM-CSF promoter : evidence for distinct activation mechanisms that mediate the response to phorbol ester…" International Immunology. 5. (1993)
[Publications] Arai,N,et al.: "Activation of Lymphokine genes in T cells: role of cis-acting DNA elements that respond to T cell activation signals" Pharmacology and Therapeutics. 55. 303-318 (1992)
[Publications] Garret,K.P.et al.: "The C-terminus of rat RAP30 is similar in sequence to region 4 of bacterial sigma factos and is required for function." J.Biol.Chem.267. 23942-9 (1992)
[Publications] Miyajima,A.et al.: "Cytokine receptors and signal transduction." Annu.Rev.Immunology. 10. 295-331 (1992)

1992 Fiscal Year Annual Research Report

活性化T細胞におけるシグナル伝達とIL-3とGM-CSF遺伝子の発現機構の解析

Principal Investigator

横田 崇 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (50134622)

Research Products

[Publications] Nakayama,N.et al.: "Use of mammalian cell expression cloning systems to identify genes for cytokines,receptors." Current Opin.Biotechnology. 3. 497-505 (1992)

[Publications] Watanabe,S.et al.: "Reconstituted human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor receptor transduces growth promoting signals in mouse NIH3T3 cells." Mol.Cell.Biol.13. (1993)

[Publications] Koyano,N.et al.: "Reconstition of the functional GM-CSF promoter : evidence for distinct activation mechanisms that mediate the response to phorbol ester…" International Immunology. 5. (1993)

[Publications] Arai,N,et al.: "Activation of Lymphokine genes in T cells: role of cis-acting DNA elements that respond to T cell activation signals" Pharmacology and Therapeutics. 55. 303-318 (1992)

[Publications] Garret,K.P.et al.: "The C-terminus of rat RAP30 is similar in sequence to region 4 of bacterial sigma factos and is required for function." J.Biol.Chem.267. 23942-9 (1992)

[Publications] Miyajima,A.et al.: "Cytokine receptors and signal transduction." Annu.Rev.Immunology. 10. 295-331 (1992)

横田崇東京大学, 医科学研究所, 助教授 (50134622)