生体内薬物濃度制御システムの開発研究-薬物代謝酵素の遺伝的多型性の解析を基礎として-

1991 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 03557101
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 鎌滝 哲也 北海道大学, 薬学部, 教授 (00009177)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 澤田 稔 北海道大学, 薬学部, 教務職員 (30215917) ; 北村 龍司 北海道大学, 薬学部, 助手 (40221212) ; 伊東 進 北海道大学, 薬学部, 助手 (70223154) ; 横井 毅 北海道大学, 薬学部, 助教授 (70135226)
• Keywords: P-450IID6 / P-450IIC / 遺伝的多型性 / P-450IA2 / カフェイン / 薬物代謝酵素 / poor metabolizer / eytensive metabolizer

Research Abstract

1)P-450IID6遺伝子の変異部位について、1991年度既に他のグル-プから85%の白人についてpoor metabolizerの判定ができたと報告された。我々は、50人の日本人について、PCR法でこの部位に関して検討したが、poor metabolizerを識別することはできなかった。よって、最近中国人で報告されたように、日本人でも白人とは異なる変異部位に起因していることも考えられた。
2)P-450IIC遺伝子の変異部位の検索については、poor metabolizerと判定された個体のgenomic DNAライブラリ-を作製し、P-450IIC18遺伝子クロ-ンを得た。現在、その塩基配列の解析は進行中である。また、P-450IIC18遺伝子の5′上流配列を約1.2kbにわたり塩基配列を決定した。今後extensive metabolizerとの比較検討を行う。
3)P-450IA2遺伝子の検討にも新たに着手し、カフェインを用いた25人のボランティアによるin vivo代謝試験を行った。このうち、poor metabolizerの個体についてゲノムDNAを調製し、引き続いてgenomicライブラリ-を作製した。現在、数個の陽性クロ-ンを単離しており、今後poor metabolizerに特異的変異の検討を行う。

Research Products

• [Publications] Fumiyuki Uematsu: "Two common RFLPs of the human CYP2E gene" Nucleic Acids Research. 19. 2803-2803 (1991)
• [Publications] Minoru Sawada: "Stable expression of monkey cytochrome P-450IAI cDNA in chinese hamster CHL cells and its application for detection of mutagenicity of aflatoxin B_1" Mutation Research. 265. 23-29 (1992)
• [Publications] Ryuji Kitamura: "Stable expression of cytochrome P-450IIIA7 cDNA in human breast cancer cell line MCF-7 and its application to cytotoxicity testing" Archs.Biochem.Biophys.292. 136-140 (1992)
• [Publications] Susumu Itoh: "Genomic organization of human fetal specific P-450IIIA7(cytochrome P-450HFLa)-related gene(s) and interaction of transcriptional regulatory factor with its DNA element in the 5′ flanking region" Biochim.Biophys.Acta. (1992)
• [Publications] Masayuki Komori: "Molecular cloning of monkey P-450IAl cDNA and expression in yeast" Biochim.Biophys.Acta. (1992)
• [Publications] Toru Yanagimoto: "Mouse liver cytochrome P-450(P-450IIIAM_1):Its cDNA cloning and inducibility by dexamethasone" Biochim.Biophys.Acta. (1992)
• [Publications] Tetsuya Kamataki: "comparative biochemistry of cytochrome P-450 species for the activation of mutagenic food-derived heterocyclic amine in “N-Oxidation of drugs"" Chapman & Hall,London, 487 (1991)
• [Publications] 鎌滝 哲也: "薬物代謝酵素の薬理的毒性学的意義の一般的検討法 “薬物代謝酵素、生物薬科学実験講座第XII巻"" 広川書店,東京, (1992)